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Whlole genome analysis in exosome from dilated cardiomyopathy occurred by aging

衰老引起的扩张型心肌病外泌体的全基因组分析

基本信息

批准号：
21H03358
负责人：
水上洋一
金额：
$ 11.07万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒトは老化に伴い、様々な病気の発症頻度が急激に増加する。心臓は24時間働き続けており加齢の影響が出やすく、心拍数の多さが寿命に関係していると言われている。実際に加齢に伴って心筋症や不整脈など心疾患が増加している。これらの疾患は、DNA変異が関与していることがわかってきており、遺伝性と後天的（孤発性）変異のケースがある。遺伝性の拡張型心筋症は親族の病歴や血液ゲノムの解析から疾患変異が解析されている。しかし、後天的な遺伝子変異の解析は量の関係で不可能であった。研究代表者らは0.2mgの組織から高純度のゲノムDNAを数ng抽出に成功したが、微量のため全ゲノム遺伝子解析はできなかった。そこで過去の心筋症原因遺伝子と報告された2987領域に対するプライマーを設計し、次世代シーケンサーで変異遺伝子を同定した。さらに蛋白質をコードしている領域すべてに対するプライマーで増幅し変異を解析する技術を確立した。その結果、新規の孤発性心筋症特異的な遺伝子変異を発見した。この変異が拡張型心筋症を発症するか検証するため、マウス個体のゲノム編集技術であるi-GONAD法を確立し、この心筋症変異マウスで拡張型心筋症の再現に成功した。しかし、この技術では全ての後天的心筋症の原因遺伝子を行うことができず、抜本的な診断手法の改善が求められる。分泌される小胞(exosome)に存在する癌遺伝子変異が存在することが報告されていることから、分泌小胞内に全遺伝子解析技術の検討を行った。

The frequency of symptoms associated with aging increases rapidly. The relationship between the number of beats and the life span of the heart is discussed. In fact, the increase of heart disease and irregular pulse is accompanied by the increase of heart disease. The disease, DNA variation, genetic variation The genetic characteristics of TCD are related to the disease of relatives and blood. It is impossible to analyze the relationship between the two. The representative of the study successfully extracted 0.2 mg of tissue from a sample of high purity DNA and analyzed the DNA in trace amounts. The cause of heart disease in the past was reported in 2987. The design of the next generation of heart disease was determined. The technology of protein analysis The results, new rules and isolated heart disease-specific genetic differences were found The I-GONAD method was successfully established for the diagnosis and treatment of STDs. The diagnosis of heart disease is based on the diagnosis of heart disease. A study on the technique of total gene analysis in secretory exosomes was carried out.