Urinary incontinence treatment with skeletal muscle-derived stem cells using rectus abdominis muscle as a transplant cell source

ヒト骨格筋間質由来幹細胞を用いた腹圧性尿失禁に対する治療法について、幹細胞の直接移植とサイトカイン投与による治療の２つのアプローチから研究を行った。幹細胞移植については、GFP-Tgマイクロミニブタから骨格筋間質由来幹細胞（Sk34,Sk-DN細胞）を分離・精製し、ヌードラット、ヌードマウスへの移植実験を行い、ブタから精製した骨格筋由来幹細胞が、骨格筋細胞（Sk-DN細胞）、末梢神経細胞、神経周膜、血管周皮細胞等に分化することを前年度までに確認した。今年度は、その結果を踏まえ、ブタ幹細胞をブタ腓骨神経損傷モデルへ移植する同種移植実験を行った。ブタのSLA（Swine Leukocyte Antigen）については、完全一致（兄弟間）、50％一致（親子間）での移植実験を行い、非免疫抑制下において、良好な腓骨神経修復と運動機能改善効果を認めた。ブタの尿道損傷モデルについては、機能測定方法の確立に難渋し、施行には至っていない。サイトカインによるラット尿道損傷モデルへの移植実験については、骨格筋間質由来幹細胞培養液上清から精製したサイトカインカクテル投与法についての検討を行った。皮下投与あるいは局所投与では、サイトカインの効果が一時的であったため、サイトカインを含ませた生体吸収性ゼラチンハイドロゲル（MedGel）を損傷部位に貼付することで、サイトカインの徐放を行うこととした。このハイドロゲルは、正電荷と負電荷の２種類のものがあり、２種を同時に貼付することで、サイトカインカクテル内の多種のサイトカインの徐放が可能となった。また、このハイドロゲルは、1カ月後には完全に吸収されており、組織修復に影響を及ぼさないことを確認した。

ヒト骨格筋間質由来幹細胞を用いた腹圧性尿失禁に対する治療法について、幹細胞の直接移植とサイトカイン投与による治療の２つのアプローチから研究を行った。幹細胞移植については、GFP-Tgマイクロミニブタから骨格筋間質由来幹細胞（Sk34,Sk-DN細胞）を分離・精製し、ヌードラット、ヌードマウスへの移植実験を行い、ブタから精製した骨格筋由来幹細胞が、骨格筋細胞（Sk-DN細胞）、末梢神経細胞、神経周膜、血管周皮細胞等に分化することを前年度までに確認した。今年度は、その結果を踏まえ、ブタ幹細胞をブタ腓骨神経損傷モデルへ移植する同種移植実験を行った。ブタのSLA（Swine Leukocyte Antigen）については、完全一致（兄弟間）、50％一致（親子間）での移植実験を行い、非免疫抑制下において、良好な腓骨神経修復と運動機能改善効果を認めた。ブタの尿道損傷モデルについては、機能測定方法の確立に難渋し、施行には至っていない。サイトカインによるラット尿道損傷モデルへの移植実験については、骨格筋間質由来幹細胞培養液上清から精製したサイトカインカクテル投与法についての検討を行った。皮下投与あるいは局所投与では、サイトカインの効果が一時的であったため、サイトカインを含ませた生体吸収性ゼラチンハイドロゲル（MedGel）を損傷部位に貼付することで、サイトカインの徐放を行うこととした。このハイドロゲルは、正電荷と負電荷の２種類のものがあり、２種を同時に貼付することで、サイトカインカクテル内の多種のサイトカインの徐放が可能となった。また、このハイドロゲルは、1カ月後には完全に吸収されており、組織修復に影響を及ぼさないことを確認した。