新規癌遺伝子５ＭＰ１によるｎｏｎ－ＡＵＧ翻訳制御の生物学的役割に関する研究

新癌基因5MP1对非AUG翻译控制的生物学作用研究

• 批准号: 18K19963
• 负责人: 浅野 桂
• 金额: $ 39.52万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Fund for the Promotion of Joint International Research (Home-Returning Researcher Development Research)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K19963/
• 关键词: 翻訳リコーディング; 翻訳制御; アデノ随伴ウィルス; non-AUG開始コドン; 翻訳メカニズム; ゲノム翻訳マップ; 翻訳制御タンパク質５M P; 反復配列依存性non-AUG(RAN)翻訳; 癌遺伝子; 翻訳制御タンパク質5MP

本年度は課題１の5MPによる翻訳制御のゲノムワイドな効果を明らかにする手法であるribosome profilingの導入を、海外より専門家を招いて行った。広島大学の外国人特任助教招聘制度を活用し、コーネル大学のShu-bing Qian研究室よりXin Shu特任助教、コーク大学のParval Baranov研究室よりMartina Yordanova特任助教を招聘した。コロナ禍により入国が大幅に遅れたものの、夏休み期間中に来日し、薬剤処理を施した癌細胞や受精初期の卵細胞を用いたライブラリを作成し次世代塩基配列決定法によって翻訳が制御されるコード領域を同定した。課題３のアデノ随伴ウイルスの翻訳制御について、5MP1とRep78, Rep68, Rep40の相互作用をBLI法により解析した。Rep78に特異的に存在するC末端断片が5MP1との高い親和性に必要であること、この断片が関わる相互作用が5MP1の酸性表面に依存することを見出した。アデノ随伴ウイルスの「ポリシストロニック」mRNAであるVP2・VP3 mRNAの全てのシストロンのルシフェラーゼレポーターを作成し、ヒト細胞内でnon-AUG開始コドンからの翻訳をエンハンスするRNA領域を二つ同定した。遺伝子治療ベクターとして使用されるアデノ随伴ウイルスの産生量を増やすというゴールに向けて、この二つのエンハンサー領域の相互作用因子を同定する実験を計画中である。

This year は subject 1 の 5 mp に よ る turn 訳 suppression の ゲ ノ ム ワ イ ド な unseen fruit を Ming ら か に す る gimmick で あ る ribosome profiling の import を, overseas よ り 専 door home を recruit い て line っ た. Hiroshima University 's recruitment system for foreign special teaching assistants: を active utilization を, コ ネ ネ ネ よ special teaching assistant for Xin Shu in the research laboratory of <s:1> shu-bing Qian university, コ コ よ special teaching assistant for Martina Yordanova in the research laboratory of Parval Baranov university を recruitment of た. コ ロ ナ disaster に よ が り into countries sharply に 遅 れ た も の の, during the summer Hugh み に し, future 薬 tonic 処 Richard を shi し た の early cancer cells や fertilization egg を with い た ラ イ ブ ラ リ を made し nextgen salt base with column decision method に よ っ て turn 訳 が suppression さ れ る コ ー を ド field with constant し た. Topic 3 の ア デ ノ with accompanying ウ イ ル ス の turn 訳 suppression に つ い て, 5 mp1 と Rep78, Rep68, Rep40 の interaction を BLI method に よ り parsing し た. Rep78 に exist specific に す る C terminal fragment が 5 mp1 と の い high affinity に necessary で あ る こ と, こ の fragment が masato わ る interaction が 5 mp1 の acid surface に dependent す る こ と を shows し た. ア デ ノ with accompanying ウ イ ル ス の "ポ リ シ ス ト ロ ニ ッ ク" mRNA で あ る VP2 · VP3 mRNA の full て の シ ス ト ロ ン の ル シ フ ェ ラ ー ゼ レ ポ ー タ ー を し, consummate ヒ で ト cell non - AUG start コ ド ン か ら の turn 訳 を エ ン ハ ン ス す る を two つ RNA field with constant し た. Heritage 伝 son treatment ベ ク タ ー と し て use さ れ る ア デ ノ with accompanying ウ イ ル ス discharge の を raised や す と い う ゴ ー ル に to け て, こ の two つ の エ ン ハ ン サ ー field を の interaction factors might be す る be 験 を project で あ る.

项目成果

University College Cork(アイルランド)

科克大学学院（爱尔兰）

コーネル大学医学部/NIAID, National Institutes of Health/ミシガン大学医学部(米国)

康奈尔大学医学院/NIAID、国立卫生研究院/密歇根大学医学院（美国）

Human oncoprotein 5MP suppresses general and repeat-associated non-AUG translation via eIF3 by a common mechanism.

• DOI: 10.1016/j.celrep.2021.109376
• 发表时间: 2021-07-13
• 期刊: Cell reports
• 影响因子: 8.8
• 作者: Singh CR;Glineburg MR;Moore C;Tani N;Jaiswal R;Zou Y;Aube E;Gillaspie S;Thornton M;Cecil A;Hilgers M;Takasu A;Asano I;Asano M;Escalante CR;Nakamura A;Todd PK;Asano K
• 通讯作者: Asano K

Kansas State University/NIDCR, NIH/Cornell University(米国)

堪萨斯州立大学/NIDCR、NIH/康奈尔大学（美国）

Kansas State University/University of Michigan/Cornell University(米国)

堪萨斯州立大学/密歇根大学/康奈尔大学（美国）