新奇機能性食品素材の応用に向けたガセリ菌の膜小胞に関する研究

本研究では、宿主と相互作用することが知られている「膜小胞（Membrane vesicle : MV）」に関して、乳酸菌のような有用細菌においてMVの知見がまだまだ少ないことに着目して、ヒト腸内乳酸菌の Lactobacillus gasseri のMVの免疫誘導能および、菌体との脂質構成や内包タンパク質の違いなどの特徴を明らかにすることで、MVを新たなバイオジェニクスとした機能性食品素材への応用の可能性を評価することを目的とした。今年度は以下の成果が得られた。L. gasseri JCM 1131T および比較対象として Staphylococcus aureus ATCC 10832 を使用して、MVの精製を行った。これらのMV画分を使用して、菌体との膜脂質組成を比較するため、まずは菌体から脂質を抽出して、カラムによってリン脂質、糖脂質、中性脂質に分けてGC-MSで分析した。その結果、全脂質に対して L. gasseri JCM 1131T では約15%、S. aureus ATCC 10832 では約35%のリン脂質が検出された。しかし、中性脂質および糖脂質の含有量に関しては安定した結果が得られなかった。今後はカラムの精製条件を検討して再度分析を実施する予定である。さらに、MVの免疫誘導能を評価するため、ヒト単球細胞株THP-1細胞を用いて、MV画分に対するIL-8の産生量をELISAによって測定した。その結果、MV画分を100 ug以上添加した場合にIL-8の誘導が確認された。一方で、菌体 (100 ug) を添加した場合と比較すると、MV画分のIL-8を誘導する量は約半分であり、菌体と比べるとMVのIL-8誘導能は低いことが示唆された。今後は、脂質構成分析を進めるとともに、MVの免疫誘導能評価を引き続き進める予定である。

本研究では、宿主と相互作用することが知られている「膜小胞（Membrane vesicle : MV）」に関して、乳酸菌のような有用細菌においてMVの知見がまだまだ少ないことに着目して、ヒト腸内乳酸菌の Lactobacillus gasseri のMVの免疫誘導能および、菌体との脂質構成や内包タンパク質の違いなどの特徴を明らかにすることで、MVを新たなバイオジェニクスとした機能性食品素材への応用の可能性を評価することを目的とした。今年度は以下の成果が得られた。L. gasseri JCM 1131T および比較対象として Staphylococcus aureus ATCC 10832 を使用して、MVの精製を行った。これらのMV画分を使用して、菌体との膜脂質組成を比較するため、まずは菌体から脂質を抽出して、カラムによってリン脂質、糖脂質、中性脂質に分けてGC-MSで分析した。その結果、全脂質に対して L. gasseri JCM 1131T では約15%、S. aureus ATCC 10832 では約35%のリン脂質が検出された。しかし、中性脂質および糖脂質の含有量に関しては安定した結果が得られなかった。今後はカラムの精製条件を検討して再度分析を実施する予定である。さらに、MVの免疫誘導能を評価するため、ヒト単球細胞株THP-1細胞を用いて、MV画分に対するIL-8の産生量をELISAによって測定した。その結果、MV画分を100 ug以上添加した場合にIL-8の誘導が確認された。一方で、菌体 (100 ug) を添加した場合と比較すると、MV画分のIL-8を誘導する量は約半分であり、菌体と比べるとMVのIL-8誘導能は低いことが示唆された。今後は、脂質構成分析を進めるとともに、MVの免疫誘導能評価を引き続き進める予定である。