小脳プルキンエ細胞が独特の形態の樹状突起を形成するin vivoでの分子機構

小脑浦肯野细胞形成独特形状树突的体内分子机制

基本信息

  • 批准号:
    19K16279
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.75万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 财政年份:
    2019
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2019-04-01 至 2021-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

今年度は、前年度に単離したマウス小脳に発現する2つのMTCL2のアイソフォームが、プルキンエ細胞に発現しているのかを調べた。そのために、野生型マウス(WTマウス)、プルキンエ細胞特異的MTCL2ノックアウトマウス(cKOマウス, exon 14を欠損)の小脳からcDNAを調製し、MTCL2の各アイソフォームを特異的に増幅するプライマーを使った定量PCRを行った。その結果、全長のMTCL2の発現はWTおよびcKOに差は無かったが、exon 5-15からなるアイソフォーム(アイソフォーム1)とexon 12-15からなるアイソフォーム(アイソフォーム2)は、cKOでの発現が明らかに少なかった。このことから、MTCL2のアイソフォーム1と2が、プルキンエ細胞で発現していると結論付けた。同定したMTCL2のアイソフォーム1と2が、プルキンエ細胞の平面状の樹状突起の形態形成に関わるのかを検証する実験には着手できなかった。アイソフォーム1と2以外にも、小脳に発現するMTCL2のアイソフォームがあるかを探索した結果、exon1-5からなるアイソフォーム3を同定した。興味深いことに、アイソフォーム3はMTCL2のexon 14を欠損したノックアウトマウス(KOマウス)の小脳で、完全に発現が消失していた。これは、MTCL2遺伝子では、exon 14がMTCL2遺伝子自体の発現の制御に関与していることを示唆する結果である。加えて、MTCL2のexon 5を認識する抗体を用いたWTとKOマウスの小脳切片の免疫染色の結果から、アイソフォーム3は小脳のバーグマングリア細胞に特異艇に発現していると考えられた。
This year's MTCL 2 has been released from the previous year's launch, and the MTCL 2 has been released from the launch. Cell specific MTCL2, wild-type MTCL2 (WT) and MTCL2 (cKO, exon 14) cDNA were modulated and quantitative PCR was performed for MTCL2 with specific amplification. The result of the test is that MTCL2 is fully developed. The difference between WT and cKO is that there is no difference between exon 5 - 15 and exon 12 - 15. This is the first time that MTCL2 has been released. In the same way, MTCL 2 can be used to detect the morphology of planar dendrites. MTCL 2 is the same as MTCL 1 and MTCL 2. In the middle of the game, the game is lost, and the game is lost completely. The MTCL2 gene expression is related to the control of MTCL2 gene expression. The results of immunostaining for MTCL2 and MTCL2 exon5 are as follows:

项目成果

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