STORM顕微鏡を用いた網膜リボンシナプスにおける神経伝達機構の解明

使用 STORM 显微镜阐明视网膜带突触的神经传递机制

• 批准号: 19K16276
• 负责人: 大島 知子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K16276/
• 关键词: 網膜; 感覚器; シナプス; リボンシナプス; アクティブゾーン; 神経伝達; グルタミン酸イメージング; カルシウムイメージング; シナプス伝達; STORM

視覚情報は網膜の視細胞で電気信号に変換された後、双極細胞を経て神経節細胞に伝達される。視細胞や双極細胞の神経終末部には、神経伝達物質グルタミン酸を含むシナプス小胞を多数繋留するシナプスリボンという特殊構造があり、光刺激に対する持続的応答を可能にしている。このシナプス部位（リボンシナプス）に局在するシナプス関連分子群が見いだされてきたが、各分子の詳細な位置関係には不明点が多い。本研究は、20 nmの超高解像度を持つSTORM顕微鏡を用い網膜リボンシナプス関連分子群の位置関係を同定する。更に、視覚障害モデルでそれらの位置関係がどのように変化するか解析する。これらにより、網膜リボンシナプスにおける神経伝達の動作機序を解明することを本研究の目的とする。令和2年度研究成果：① 落射型顕微鏡による網膜リボンシナプス関連分子に対する抗体の最適化を継続し、超解像顕微鏡による観察への準備を整えた。② 生理的条件下におけるシナプスリボン、カルシウム流入部位、グルタミン酸放出部位の相互位置関係を把握するために、キンギョ網膜Mb1型双極細胞軸索終末部においてローダミン系蛍光色素（5-tetramethylrhodamine-5-iodoacetamide dihydroiodide, 5-TMRIA）をコンジュゲートしたCtBP結合ペプチドによりシナプスリボンを標識した上で、蛍光カルシウム色素（Fluo-4FFやRhod-FFなど）によりカルシウム流入部位、蛍光グルタミン酸色素（enhanced glutamate optical sensor, eEOS）によりグルタミン酸放出部位を同定した。その結果、カルシウム流入部位、グルタミン酸放出部位ともにシナプスリボンに近接していることが確認された。

After the mobile phone network monitors the cell phone signal, the bipolar cell phone has reached a high level of success. It is possible to monitor the bipolarity of the cell, the end of the cell, the end of the cell, the acid, the acid, the cell, the cell. The location of each molecule is much more unknown than that of the molecular group. In this study, 20 nm ultra-high resolution (UHI) is consistent with the location of the molecular cluster of the STORM microphone. Make sure that you are in a better position to analyze the situation. In order to understand the purpose of this study, the action sequence of the action mechanism has been developed. The research results of Ling he in 2000 are as follows: (1) the fall-off microphone network, the network network, the molecular antibody, the antibody. (2) under physiological conditions, the inflow site, the inflow site, the acid release site, the bipolar cord of MB1 and the end of the Mb1 bipolar cell line of the network membrane are sensitive to each other, and the end of the bipolar cord of the network membrane is sensitive to light pigments (5-tetramethylrhodamine-5-iodoacetamide dihydroiodide). 5-TMRIA)

项目成果

Optical measurement of glutamate release from multiple ribbon-type synapses at the terminal of goldfish retinal bipolar cell

金鱼视网膜双极细胞末端多个带状突触谷氨酸释放的光学测量

• 发表时间: 2019
• 作者: Oshima-Takago;T.;Sakamoto;H.;Namiki;S.;Hirose;K.;Tachibana;M.;Takago;H.
• 通讯作者: H.

Novel imaging of glutamate release from the ribbon type synapses of goldfish retinal bipolar cell terminal

金鱼视网膜双极细胞末端带状突触谷氨酸释放的新成像

• 发表时间: 2020
• 作者: Tomoko Oshima-Takago;Hirokazu Sakamoto;Shigeyuki Namiki;Kenzo Hirose;Masao Tachibana;Hideki Takago
• 通讯作者: Hideki Takago

Glutamate imaging at the ribbon-type synapses in the goldfish retinal bipolar cell terminal

金鱼视网膜双极细胞终端带状突触的谷氨酸成像

• 发表时间: 2021
• 作者: Tomoko Oshima;Hirokazu Sakamoto;Yukihiro Nakamura;Shigeyuki Namiki;Kenzo Hirose;Masao Tachibana;Hideki Takago
• 通讯作者: Hideki Takago