DNA二本鎖切断を誘導し、口腔癌の原因となる歯周病菌と病原因子の特定

牙周病细菌和诱导DNA双链断裂并导致口腔癌的致病因素的鉴定

• 批准号: 19K16647
• 负责人: 手島 理絵
• 金额: $ 2.08万
• 依托单位: Oita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K16647/
• 关键词: パルスフィールド電気泳動; 歯周病菌; 好気性菌; 嫌気性菌; 上清; 感染時間; 口腔癌; DNA double-surand beak

歯周病原因菌のスクリーニングと解析入手していたATCCや他の研究機関で分離された菌株を使用し、SAS細胞に歯周病菌や上清を感染させ、一定時間感染させた後、感染細胞を回収し、パルスフィールド電気泳動を行い、DNAをEtBrにて染色し評価を行った。好気性菌である、Streptococcus anginosus、Streptococcus sanguinis （ATCC105576）、Streptococcus gordoni（ATCC10558）、Enterococcus faecalis（ATCC19433）、Streptococcus mutance(ATCC25175)について検討を行った。これら好気性菌は細胞の培地内で急速に増加するため、MOIを小さくしても、24時間後には細胞が死滅してしまう。しかし、SAS細胞にAggregatibacter actinomycetemcomitansを感染させた実験結果より、DBSの蓄積には24時間以上の感染が必要であるため、液体培地で培養した上清を感染させることとした。1種類の菌の上清をSAS細胞に感染させ、24時間後に細胞を回収し、パルスフィールド電気泳動を行ったが、DSBを示唆する所見を得ることができなかった。口腔内では菌はバイオフィルムを形成し、相互作用により歯周病を発症しているため、1種類の菌のみの感染ではなく、複数の菌の上清をを混和させて感染を試みたが、DBSを示唆する所見は認めなかった。

歯 weeks disease causes bacterium の ス ク リ ー ニ ン グ と parsing of し て い た ATCC や he の study machine masato で separation さ れ た strains を using し, SAS cells に 歯 weeks germs や supernatant を infection さ せ, infection of certain time さ せ た, infected cells after を back 収 し, パ ル ス フ ィ ー ル ド electric line 気 swimming を い, DNA を EtBr に て dyeing し review 価 っ を line Youdaoplaceholder0. Aerobic bacteria である, Streptococcus anginosus, Streptococcus sanguinis (ATCC105576), Streptococcus gordoni (ATCC10558), Enterococcus faecalis (ATCC19433), Streptococcus mutance(ATCC25175)に に に て検 て検 discuss を rows った. こ れ ら の good bacteria は 気 sex cells within the petty で に raised rapidly add す る た め, MOI を small さ く し て も, 24 time after に が は cells die out し て し ま う. し か し, SAS cell に Aggregatibacter actinomycetemcomitans を infection さ せ た be 験 results よ り, DBS の accumulation に は 24 time above の infection が necessary で あ る た め, liquid petty で cultivate し た supernatant を infection さ せ る こ と と し た. 1 species の bacteria の cells in supernatant を SAS に さ せ, 24 を に cells after 収 back し, パ ル ス フ ィ ー ル ド electric line 気 swimming を っ た が, DSB を in stopping す を る had seen too る こ と が で き な か っ た. Bacteria in the mouth で は は バ イ オ フ ィ ル ム を し, interaction に よ り 歯 weeks disease を 発 disease し て い る た め, 1 species の bacteria の み の infection で は な く, plural の bacteria の supernatant を を mixed さ せ て infection を try み た が, DBS を sucking す は る see recognize め な か っ た.