乳癌転移性脳腫瘍モデルに対する間葉系幹細胞を用いた腫瘍溶解性ウイルス投与法の開発

使用间充质干细胞开发溶瘤病毒给药方法用于乳腺癌转移性脑肿瘤模型

• 批准号: 19K16873
• 负责人: 清水 勇三郎
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K16873/
• 关键词: 腫瘍溶解性ウイルス; 間葉系幹細胞; 転移性脳腫瘍; 転移性脳腫瘍マウスモデル; 乳がん; 腫瘍溶解性ウィルス

転移性脳腫瘍を形成しやすい傾向のあるヒト由来乳がん細胞株を複数入手し、in vivoの実験を継続している。マウスの転移性脳腫瘍モデル作成および薬剤頸動脈投与を行うための実験機材、設備を整え実験を開始している。マウスモデル作成の実験として、ヒト由来乳癌細胞株にLuciferaseを遺伝子導入してから、内頸動脈から動脈注射する実験を行った。一定期間の飼育の後、in vivo イメージングシステムにて腫瘍形成を評価したが、頭蓋外への腫瘍形成を認めた。また、別のモデル作成の方法として、同細胞を心房内に注射して腫瘍形成を評価したが、脊髄や体幹部への腫瘍形成を示す結果となった。転移性脳腫瘍を形成しやすく、なおかつこれまでのin vitroの実験において間葉系幹細胞の指向性が高いと評価された細胞株を用いて同様の実験を行いモデル作成を継続している。その他に、これまではNudeマウスを用いて実験を行っていたが、より腫瘍形成をしやすい環境を作るため、免疫不全レベルの高いSCID Beigeマウスを用いた実験も行っている。より臨床に即した実験系をたてるために、患者由来の乳癌細胞株樹立も継続して行なっている。手術により摘出した乳癌原発の転移性脳腫瘍検体を用いて初代細胞培養を行っている。培地は従来の血清を含むものに加え、腫瘍の幹細胞性を維持した株を樹立するため無血清培地を用いた樹立の実験を行なっている。

我们已经获得了多种人类衍生的乳腺癌细胞系，这些细胞倾向于形成转移性脑肿瘤，并继续在体内进行实验。我们已经准备了实验设备和设备，用于在小鼠中创建转移性脑肿瘤模型并施用颈动脉。作为创建小鼠模型的实验，我们进行了一个实验，其中荧光素酶被转移到人源性的乳腺癌细胞系中，然后通过颈内动脉注入动脉。饲养一段时间后，使用体内成像系统评估了肿瘤的形成，但在颅骨外观察到肿瘤形成。创建模型的另一种方法是通过将相同细胞注入中庭来评估肿瘤形成，结果显示脊髓和躯干中的肿瘤形成。使用类似的实验，使用易于转移性脑肿瘤的细胞系继续进行建模，并被评估为在先前的体外实验中具有高方向性间充质干细胞。此外，到目前为止，已经使用裸鼠进行了实验，但是为了创建更可能引起肿瘤形成的环境，已经使用具有高度免疫缺陷水平的SCID米色小鼠进行了实验。为了创建一个更临床相关的实验系统，我们正在继续建立从患者中得出的乳腺癌细胞系。使用原发性乳腺癌的外科手术去除转移性脑肿瘤标本进行原代细胞培养。除了传统的含血清的培养基外，我们还进行了无血清实验，以建立一种使用无血清培养基维持肿瘤干细胞特性的菌株。

项目成果

Characterization of patient-derived bone marrow human mesenchymal stem cells as oncolytic virus carriers for the treatment of glioblastoma

患者骨髓间充质干细胞作为溶瘤病毒载体治疗胶质母细胞瘤的特征

• DOI: 10.3171/2021.3.jns203045
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Neurosurgery
• 影响因子: 4.1
• 作者: Shimizu Yuzaburo;Gumin Joy;Gao Feng;Hossain Anwar;Shpall Elizabeth J.;Kondo Akihide;Parker Kerrigan Brittany C.;Yang Jing;Ledbetter Daniel;Fueyo Juan;Gomez-Manzano Candelaria;Lang Frederick F.
• 通讯作者: Lang Frederick F.

患者由来の骨髄間葉系幹細胞を用いた腫瘍溶解性ウイルス投与による膠芽腫治療

使用患者来源的骨髓间充质干细胞施用溶瘤病毒治疗胶质母细胞瘤

• 发表时间: 2020
• 作者: Shimizu Yuzaburo;Gumin Joy;Gao Feng;Hossain Anwar;Shpall Elizabeth J.;Kondo Akihide;Parker Kerrigan Brittany C.;Yang Jing;Ledbetter Daniel;Fueyo Juan;Gomez-Manzano Candelaria;Lang Frederick F.;清水勇三郎
• 通讯作者: 清水勇三郎