病変局所のIL-23産生マクロファージを標的とした炎症性筋疾患の新規治療開発
开发针对病变部位产生 IL-23 的巨噬细胞的炎症性肌肉疾病的新疗法
基本信息
- 批准号:19K16974
- 负责人:
- 金额:$ 2.75万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
- 财政年份:2019
- 资助国家:日本
- 起止时间:2019-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1)傷害を受けた筋線維由来の液性因子がマクロファージからのIL-23産生を誘導するかをin vitroで検証した。マウス骨髄由来マクロファージ(BMDM)を培養し、筋炎動物モデルから採取した筋組織のホモジェネートを添加して、培養上清中のIL-23をELISA法で測定した。BMDMは、M-SCFで培養後に IFNγ、IL-4、IL-10、IL-13等のサイトカインでpolarizationさせ、幾つかの条件を置いた。ホモジェネートを添加する前の段階で、classically activated に近いIFNγ+LPSなどで培養した上清中では、IL-23の産生が見られ、このような系ではホモジェネートの添加により上清中のIL-23濃度は低下した。また、他の条件のBMDMを用いた場合の上清中のIL-23の産生量は軽微であった。筋組織のホモジェネート内に細胞の活性化状態について抑制的に働く分子も含まれている可能性や、上清中のIL-23測定では感度が劣る可能性が考えられた。2) 1)の結果を受けてホモジェネートは使用せず、IL-23誘導に関与すると予測しているC型レクチン受容体のリガンド分子のリコンビナント蛋白をBMDMに添加し、IL-23の産生についてはフローサイトメトリーでIL-23の細胞内染色を行った。当教室で筋炎モデルで病態に関与することを示したHMGB-1や、Zymosan等複数のC型レクチン受容体のリガンドによる培養で、IL-23の産生誘導を確認することができた。IL-23産生の評価系として、FCMでの細胞内染色が有効と考えられた。3) 2020年度までに1検体行った患者筋生検検体由来のマクロファージのsingle cell RNAシークエンスについては、患者検体からの細胞単離は行ったものの、シークエンス予算の見通しが難しく、ライブラリー作成まで到達しなかった。
1) the cause of the injury is due to the liquid factor, the production of IL-23, the production of in vitro and the severity of the disease. The cause of the disease is that the tissue tissue is collected, the tissue is added, and the supernatant is determined by IL-23 ELISA. After BMDM and M-SCF training, IFN γ, IL-4, IL-10, IL-13, etc., were tested, and the conditions were set. Please add the previous segment, classically activated, IFN γ + LPS, the supernatant, the IL-23, the IL-23, the supernatant, the supernatant. He conditioned BMDM to use IL-23 in the supernatant of the supernatant, the quantity of the product and the quantity of the product. In the tissue tissue, the activation of the cells in the tissue, the activation of the cells, the inhibition of the molecular weight in the tissue, the possibility of the sensitivity in the supernatant, and the possibility of poor sensitivity in the supernatant were detected in the supernatant. 2) 1) the results showed that the results were determined by the use of DNA, IL-23, and so on. The results showed that there was a significant increase in the molecular weight of the receptor, the molecular marker, the protein, the BMDM protein, the IL-23 protein, and the intracellular staining of IL-23. When the classroom is full of symptoms and signs, such as HMGB-1, Zymosan and other complex numbers, such as type C, type C, receptive body, and IL-23, make sure that there is no sign of pain. There was a positive correlation between IL-23 and FCMG intracellular staining. 3) in the year of 2020, the cause of the patient's health is the cause of the disease. The patient's body is separated from the single cell RNA and the patient's body is separated from the body.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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- DOI:
- 发表时间:2020
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:小松孝行;三島健太郎;水野慶子;平野宏;斎藤文洋; 高見浩樹;大場次郎;野村智久;杉田学;小松孝行;梅澤 夏佳
- 通讯作者:梅澤 夏佳
炎症性筋疾患を対象とした低侵襲筋生検法の有用性
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- DOI:
- 发表时间:2020
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:小松孝行;三島健太郎;水野慶子;平野宏;斎藤文洋; 高見浩樹;大場次郎;野村智久;杉田学;小松孝行;梅澤 夏佳;梅澤 夏佳
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