肝細胞癌におけるヒストンメチル化酵素G9aのエピジェネティックな制御機構の解明

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はじめに、HCCにおいてのG9a標的遺伝子の検討として次世代シークエンサーを用いた網羅的解析を行った。具体的には、short hairpin RNA(shRNA)を用いてG9aをノックダウンしたHuh7細胞のstable 株を作成し、ChIP-seqおよびRNA-seqを行い、両者の統合解析によりG9aの直接的な標的候補として96遺伝子を同定した。それらの候補からいわゆる癌抑制遺伝子であるp21/WAF1CIP1に今回特に着目した。シークエンス解析およびChIP-PCR等を用いてG9aとp21の関係について分析を進め、p21とヒストンメチル化およびアセチル化の関係を解析した。結果、G9aによりp21が抑制的に制御されている傾向は認められたものの、アセチル化との関連は明確には結論付けられなかった。今後の課題として、アセチル化もしくは他のエピジェネティックな制御機構も視野に入れて、G9aがHCCの発生・進展の過程において果たしている制御機構を解明することが挙げられる。また、G9aとp21の臨床検体レベルにおける発現とその臨床背景の検証を実施した。具体的にはシークエンス解析によりG9aの標的候補の1つとして同定された、p21とG9aの発現量の相関を手術検体の免疫染色などを用いて検討し、結果、両者の発現量には負の相関関係が認められ、G9aがp21発現を抑制的に制御している可能性が組織レベルでも示唆された。最後に、計画していたG9aの機能阻害によるp21の脱抑制の過程におけるヒストンアセチル化の意義の検証は十分に実施できなかった。今後の研究課題として上記研究を継続し、G9aがどのようにエピジェネティックな制御機構によりHCCの発生・進展に大きな役割を果たしているのか、そしてそのメカニズムを抑制することはHCCの新たな治療戦略の一端となるかどうかの可能性の探求が望まれる。