NASHにおけるPKRを介した肝星細胞の活性化と肝細胞癌進展機序の解明

阐明 NASH 中 PKR 介导的肝星状细胞活化和肝细胞癌进展机制

• 批准号: 19K17466
• 负责人: 今井 祐輔
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K17466/
• 关键词: 肝星細胞; LPS; PKR; MAPK; IL-1β; NASH; 肝細胞癌

Protein kinase R（PKR）は肝細胞癌において高発現し、癌細胞増殖促進に寄与していることが同定されている。刺激された肝星細胞（HSC）においてもPKRが高発現することが報告されているが、その生理的作用、特にHCCに対する役割は不明な点が多い。そこで、報告者はヒト肝星細胞株（LX-2）を用い、LPSで刺激されたHSCのPKR活性化と、サイトカイン産生を評価した。LX-2をLPS(100ng/ml)で刺激し、PKR、リン酸化PKR、ERK1/2、JNK、肝星細胞の活性化マーカー（αSMA等）、サイトカイン(IL-1β等)の発現の評価を行った。LPS刺激されたLX-2ではRT-PCRで、PKR、IL-1βの発現が、コントロールと比べ有意に亢進していた。αSMAの発現に変化は見られなかった。ウェスタンブロットで、リン酸化PKRが、LPSで刺激されたLX-2で亢進していることを確認した。また、PKRの下流のMAPK経路の評価をウェスタンブロットで行った。MAPKカスケードの分子であるERK1/2、JNK、c-Fos、c-Junは、LPS刺激によりリン酸化が亢進した。さらに、ELISAでLX-2のIL-1β産生能の評価を行った。ELISAでは、LX-2からのIL-1βの分泌が、LPSによる刺激で増加した。LPSで刺激したLX-2をPKR阻害剤で処理すると、LPS刺激によるPKRリン酸化、IL-βの産生亢進は打ち消された。今回の検討により、LPSで刺激された肝星細胞でPKR及びその下流のMAPKカスケードが活性化し、そのPKR依存性にIL-1βの産生が亢進することが示された。

Protein kinase (PKR) R は hepatocellular carcinoma に お い て 発 し now, cancer cells promote に send good colonization and し て い る こ と が with fixed さ れ て い る. Stimulate さ れ た liver astrocyte (HSC) に お い て も PKR が high 発 now す る こ と が report さ れ て い る が, そ の physiological role, に HCC に す seaborne る cut は unknown な point が い more service. そ こ で, reporter は ヒ ト liver astrocyte strain (LX - 2) を い, LPS で stimulus さ れ た HSC の PKR activeness と, サ イ ト カ イ ン produce を review 価 し た. LX - 2 を LPS (100 ng/ml) で stimulus し, PKR, リ ン acidification PKR, ERK1/2, JNK, liver astrocyte の activeness マ ー カ ー (alpha SMA, etc.), サ イ ト カ イ ン (IL - 1 beta, etc.) の 発 is の review 価 を line っ た. LPS stimulation さ れ た LX - 2 で は rt-pcr で, PKR, IL - 1 beta の 発 が, コ ン ト ロ ー ル と than べ intentionally に hyperthyroidism し て い た. The に variation of αSMA is られな られな った った. ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト で, リ ン acidification PKR が, LPS で stimulus さ れ た LX - 2 で hyperthyroidism し て い る こ と を confirm し た. Youdaoplaceholder0, PKR <s:1> downstream <s:1> MAPK business <s:1> review 価をウェスタ ブロットで ブロットで industry った. MAPK カ ス ケ ー ド の molecular で あ る ERK1/2, JNK, c Fos, c - Jun は, LPS stimulation に よ り リ ン acidification が hyperthyroidism し た. Youdaoplaceholder0, ELISAでLX-2 <s:1> IL-1β production capacity <s:1> evaluation 価を line った. ELISAで, LX-2 ら ら <s:1> IL-1β secretion が, LPSによる stimulation で increase た た. LPS で stimulus し た LX - 2 を PKR resistance against tonic で 処 Richard す る と, LPS stimulation に よ る PKR リ ン acidification, IL - beta の produce hyperthyroidism は ち さ elimination れ た. Today back の beg に 検 よ り, LPS で stimulus さ れ た liver astrocyte で PKR and び そ の obscene の MAPK カ ス ケ ー ド が activeness し, そ の PKR dependency に IL - 1 beta の produce が hyperthyroidism す る こ と が shown さ れ た.