くも膜下出血後早期脳損傷におけるLOX-1の役割

LOX-1在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的作用

• 批准号: 19K18375
• 负责人: 松田 尚也
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K18375/
• 关键词: 脳血管障害; 脳神経疾患

ラットSAHモデルおよびコントロール群の作成を行い、以下の項目の検討を継続している。・酸化LDL、LOX-1の検出：脳血管壁における酸化LDL、LOX-1の免疫染色、及びRT-PCRによる発現量を計測する。本項目では、SAHモデルの脳血管壁において酸化LDL、LOX-1の発現が増加している可能性が示唆された。引き続き以下の項目の検討を進めていく。・神経細胞のapoptosis (ELISA)検出：Caspase3をELISAにて測定する。生体標本として取り出し-80℃にて保存した大脳皮質から蛋白を抽出し、ELISAにて測定、アポトーシスの指標とする。・血管内皮細胞のapoptosis (TUNEL染色)検出：両側基底核および両側脳皮質の切片を摘出し、TUNEL染色を行う。DNA断片化を光顕にてコントロール群と比較してアポトーシスの指標とする。・血液脳関門の破綻(Evans blue染色)：予めEvansblue(50mg/kg)を腹腔内投与し灌流固定する。測定値をEvans blueの標準曲線(0.5-40 μg/ml)から色素量として計算し、血液脳関門破綻の指標とする。・脳浮腫の程度(脳乾燥法)：生体摘出標本にて、脳乾燥による重量測定により、脳浮腫を評価する。・脳微小血栓の測定：脳皮質細動脈におけるFITC-dextran蛍光染色、Fibrinogen免疫染色、Collagen4免疫染色にて微小血栓の検出を行う。・脳内微小血管内皮細胞障害の測定：脳底動脈切片を摘出し、eNOS・MMP-9抗体染色およびELISAを行う。また、末梢血d-ROM測定を行い、酸化ストレスによる血管障害・炎症所見の指標とする。

The following items are discussed in the process of creating a group of SAH and C groups. Detection of acidified LDL and LOX-1: Immunostaining and RT-PCR detection of acidified LDL and LOX-1 in the vascular wall This project demonstrates the possibility of increased production of LDL and LOX-1 in the blood vessel wall of SAH.引き続き以下の项目の検讨を进めていく。·Neuronal apoptosis (ELISA) detection: Caspase3 ELISA detection. In vivo, samples were collected and stored at-80℃ for protein extraction, ELISA assay, and other indicators. Vascular endothelial cell apoptosis (TUNEL staining): lateral basal nucleus and lateral cortex sections were extracted and TUNEL staining was performed. DNA fragmentation is an indicator of DNA fragmentation. Evans blue staining: Evanblue (50mg/kg) was administered intraperitoneally and fixed by perfusion. The standard curve of Evans blue (0.5-40 μg/ml) was measured. Degree of edema (drying method): weight measurement of organic extract, drying, edema evaluation. Detection of microthrombi: detection of microthrombi by FITC-dextran staining, Fibrinogen immunostaining, Collagen4 immunostaining in cortical arterioles. Detection of microvascular endothelial cell damage in the aorta: extraction of basal artery sections, eNOS·MMP-9 antibody staining and ELISA. The measurement of peripheral blood d-ROM, acidification, vascular damage, inflammation and other indicators