The role of Neuro-Immuno-Vascular Unit in growth and invasion of Glioma

神经免疫血管单元在胶质瘤生长和侵袭中的作用

• 批准号: 19K18433
• 负责人: 植川 顕
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K18433/
• 关键词: 悪性神経膠腫; 腫瘍微小環境; 骨髄由来免疫細胞; 脳血管周囲マクロファージ; 腫瘍血管新生; VEGF; 脳内腫瘍免疫; 血管新生; 脳内マクロファージ; グリオーマ; 神経-免疫-血管ユニット

本研究の目的は、悪性神経膠腫の増殖・浸潤・血管新生において、腫瘍関連の免疫細胞である骨髄由来マクロファージ、リンパ球などと脳常在性の脳血管周囲マクロファージとの相互作用を解明し、臨床応用により新たな治療戦略を確立することである。2019-2021年度に引き続き、悪性神経膠腫患者から採取した腫瘍組織検体を用いて、免疫染色により脳血管周囲マクロファージが脳腫瘍細胞の増殖・浸潤にどのように関わっているか関連を評価している。腫瘍本体と腫瘍周辺の浸潤部組織を用い、腫瘍細胞の浸潤、血管構築と免疫細胞について評価を行った。免疫細胞はミクログリア（Iba1抗体）、脳常在性マクロファージ（CD206体）、単球・未熟マクロファージ（CD68抗体）、腫瘍関連性M2マクロファージ（CD163抗体）を染色評価した。さらに、共焦点顕微鏡を用いて患者の脳組織サンプルから腫瘍周囲の微小血管と腫瘍内の造成血管の構造変化や、VEGFをはじめとした血管新生に関わる蛋白の染色評価を行った。また、マウス脳内腫瘍移植モデルや腫瘍細胞の培養により、サンプルや検査キットの準備を行いVEGF、IL-6 、MMP-9 、TNFαなどの血管増殖因子・サイトカインの発現をELISAや定量PCRで評価している。これまでの研究で、脳血管周囲マクロファージは免疫受容体CD36を介してNADPH oxidase経路により活性酸素種を産生し、悪性神経膠腫の腫瘍細胞に対し殺細胞作用を示す可能性が考えられる。この研究の意義は、悪性神経膠腫の微小環境において、免疫細胞の相互作用や血管新生の機序を解明することにより、従来の化学療法や放射線療法に耐性を示す症例に対する新たな治療法を確立する基盤となり、今後の研究を進めるために重要な結果となる。また、上記の手法を下垂体腺腫や髄膜腫、転移性脳腫瘍などの脳腫瘍にも応用し研究を進める。

The aim of this study is to elucidate the genesis, invasion, angiogenesis, tumor-related immune cell interactions, and clinical implications of neuroma. 2019-2021 The tumor tissue samples were collected from patients with neuroglioma and evaluated for their relationship with proliferation and infiltration of tumor cells by immunostaining. The tumor body, the tumor periphery, the infiltration of tumor cells, the vascular architecture, and the evaluation of immune cells Immunohistochemical staining was performed on immune cells, including Iba1 antibody, CD206 antibody, CD68 antibody, CD163 antibody. In addition, confocal microscopy was used to evaluate the structural changes of blood vessels and VEGF in the tissues of the patients. The development of VEGF, IL-6, MMP-9, TNFα and VEGF in the preparation of tumor cell culture and screening for tumor cells was evaluated by ELISA and quantitative PCR. These studies have demonstrated the possibility of cytocidal effects on tumor cells in rat neuroblastoma, especially on the production of reactive acid species mediated by NADPH oxidase pathway in the immune receptor CD36. The significance of this research is to understand the microenvironment of neuroma, the interaction of immune cells and the mechanism of angiogenesis, to establish a baseline for future research, to establish new therapies for chemotherapy and radiotherapy, to demonstrate patient tolerance, and to provide important results. The study on the application of the technique for hypophysis, pituitary gland swelling, metastatic swelling and other diseases is progressing.

项目成果

Macrophage colony‐stimulating factor potentially induces recruitment and maturation of macrophages in recurrent pituitary neuroendocrine tumors

• DOI: 10.1111/1348-0421.13041
• 发表时间: 2022-12
• 期刊: Microbiology and Immunology
• 影响因子: 2.6
• 作者: Hiroaki Matsuzaki;Y. Komohara;H. Yano;Yukio Fujiwara;Keitaro Kai;Rin Yamada;D. Yoshii;Ken Uekawa;N. Shinojima;Yoshiki Mikami;A. Mukasa