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慢性移植片対宿主病マウスモデルを用いた角膜輪部機能不全と間葉上皮転換の関連の検討

使用慢性移植物抗宿主病小鼠模型检查角膜缘功能障碍与间充质上皮转化之间的关系

基本信息

批准号：
19K18902
负责人：
福井正樹
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tokyo Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

２０２２年度もＣＯＶＩＤー１９感染の影響を受け、実験の進行が予定通り進めなかった。また、当初実験予定であった慶應義塾大学での慢性移植片対宿主病マウスモデルの作成が困難となり、自施設での研究を遂行した。本年度もアルカリ化学外傷モデルマウスを作成し、そのＢｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ－７の発現の評価を試みた。昨年度開発した角膜上皮細胞のみ回収して解析を行う方法を用いてアルカリ化学外傷モデルマウスの角膜上皮細胞からのｍＲＮＡ抽出を検討したところ、安定して採取が行えるようになった。その上でreal time PCR解析を行った。アルカリ化学外傷眼では対照群である非アルカリ化学外傷眼である僚眼に比べ、Ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ－７のｍｅｓｓｅｎｇｅｒ　ＲＮＡ発現量が０．３９１倍（ｔ検定　ｐ＝０．０１１）と有意に低下していた。これを裏付けるために角膜組織におけるＢｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ－７の免疫染色による証明を行ったが、凍結切片での免疫染色性が悪く、十分な根拠となっていない。２０２３年度に免疫染色法を条件検討し、組織学検討によるＢｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ－７の発現の証明を行っていきたい。この証明がされると、角膜輪部機能不全における上皮間葉転換の関与、またそこに注目した間葉上皮転換を利用した治療法の確立につながると考える。

In 2022, the impact of COVID-19 infection will be affected and the progress will be determined. It was initially decided that Keio University would be able to develop a chronic transplantation chip for host disease and it would be difficult to do so, and the research was carried out at the self-organized facility. This year's もアルカリchemical trauma モデルマウスをmade し、そのＢｏｎｅｍｏｐｈｏｇｎｅｔｅｋｐｒｏｔｅｎｎ－７の発行のreview価をtestみた. Last year's opening of the corneal epithelial cell recovery method and analysis of the method and application of chemical trauma treatment.スのcorneal epithelial cell からのｍＲＮＡ extracted を検したところ, stable して took が行えるようになった.その上でreal time PCR analysis を行った.アルカリChemical trauma to the eye では対毾淳である non アルカリChemical trauma to the eye である抯眼に比べ、Ｂｏｎｅ morphogenic Protein-7のmessenger ．391 times (t検determinedｐ=0.011) and it is intentionally low.これを里发けるためにcorneal tissueにおけるＢｏｎｅｍｏｐｏｏｇｎｎｅｃｐｒｏｔｽｎｎ７のimmunostaining によるproves を行ったが, frozen sections でのimmunostaining がく, 10なgenとなっていない. 2023 にimmunostaining method を condition discussion し, histology discussion によるＢbone morphogenetic ｐｒｏｔｅｎｎ－７の発行のproofを行っていきたい.このproven がされると、Corneal insufficiency におけるThe relationship between epithelial and mesenchymal exchange, またThe focus of attention is on the use of mesenchymal epithelial epithelial replacement and the establishment of therapeutic methods.