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慢性移植片対宿主病マウスモデルを用いた角膜輪部機能不全と間葉上皮転換の関連の検討

使用慢性移植物抗宿主病小鼠模型检查角膜缘功能障碍与间充质上皮转化之间的关系

基本信息

批准号：
19K18902
负责人：
福井正樹
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tokyo Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

２０２２年度もＣＯＶＩＤー１９感染の影響を受け、実験の進行が予定通り進めなかった。また、当初実験予定であった慶應義塾大学での慢性移植片対宿主病マウスモデルの作成が困難となり、自施設での研究を遂行した。本年度もアルカリ化学外傷モデルマウスを作成し、そのＢｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ－７の発現の評価を試みた。昨年度開発した角膜上皮細胞のみ回収して解析を行う方法を用いてアルカリ化学外傷モデルマウスの角膜上皮細胞からのｍＲＮＡ抽出を検討したところ、安定して採取が行えるようになった。その上でreal time PCR解析を行った。アルカリ化学外傷眼では対照群である非アルカリ化学外傷眼である僚眼に比べ、Ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ－７のｍｅｓｓｅｎｇｅｒ　ＲＮＡ発現量が０．３９１倍（ｔ検定　ｐ＝０．０１１）と有意に低下していた。これを裏付けるために角膜組織におけるＢｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ－７の免疫染色による証明を行ったが、凍結切片での免疫染色性が悪く、十分な根拠となっていない。２０２３年度に免疫染色法を条件検討し、組織学検討によるＢｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ－７の発現の証明を行っていきたい。この証明がされると、角膜輪部機能不全における上皮間葉転換の関与、またそこに注目した間葉上皮転換を利用した治療法の確立につながると考える。

In 2022, the impact of COVID-19 infection was affected, and the progress was determined. The study of chronic graft versus host disease was carried out in Keio University. This year's evaluation of the development of Bone morphogenetic protein-7 A method for the analysis of corneal epithelial cell apoptosis was developed last year. The method was used to extract mRNA from corneal epithelial cells after chemical trauma. Real time PCR analysis was performed. The expression of Bone morphogenetic protein-7 messenger RNA was 0.391 times (t =0.011) lower than that of the control group in the eyes with chemical trauma. The immunostaining of Bone morphogenetic protein-7 in corneal tissue was proved by frozen sections. In 2023, the immunostaining method was used to investigate the conditions and histological analysis of Bone morphogenetic protein-7. This paper proves that the epithelial mesenchymal transition is related to corneal wheel dysfunction, and the establishment of therapeutic methods for mesenchymal epithelial transition is discussed.