慢性移植片対宿主病マウスモデルを用いた角膜輪部機能不全と間葉上皮転換の関連の検討

使用慢性移植物抗宿主病小鼠模型检查角膜缘功能障碍与间充质上皮转化之间的关系

• 批准号: 19K18902
• 负责人: 福井 正樹
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K18902/
• 关键词: BMP7; 角膜; 角膜輪部機能不全; 間葉上皮転換; 慢性移植片対宿主病マウスモデル; 慢性移植片対宿主病; マウスモデル

２０２２年度もＣＯＶＩＤー１９感染の影響を受け、実験の進行が予定通り進めなかった。また、当初実験予定であった慶應義塾大学での慢性移植片対宿主病マウスモデルの作成が困難となり、自施設での研究を遂行した。本年度もアルカリ化学外傷モデルマウスを作成し、そのＢｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ－７の発現の評価を試みた。昨年度開発した角膜上皮細胞のみ回収して解析を行う方法を用いてアルカリ化学外傷モデルマウスの角膜上皮細胞からのｍＲＮＡ抽出を検討したところ、安定して採取が行えるようになった。その上でreal time PCR解析を行った。アルカリ化学外傷眼では対照群である非アルカリ化学外傷眼である僚眼に比べ、Ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ－７のｍｅｓｓｅｎｇｅｒ　ＲＮＡ発現量が０．３９１倍（ｔ検定　ｐ＝０．０１１）と有意に低下していた。これを裏付けるために角膜組織におけるＢｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ－７の免疫染色による証明を行ったが、凍結切片での免疫染色性が悪く、十分な根拠となっていない。２０２３年度に免疫染色法を条件検討し、組織学検討によるＢｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ－７の発現の証明を行っていきたい。この証明がされると、角膜輪部機能不全における上皮間葉転換の関与、またそこに注目した間葉上皮転換を利用した治療法の確立につながると考える。

In the year 2022, COVID 19 infection will be affected, and the forecast will be carried out. In the first place, it was decided that the chronic transplant should be made into a chronic graft, the host disease should be induced, and the self-designed research should be performed. This year, the chemical surgery program has been completed, and the Bone morphogenetic protein-7 program has been completed. Last year, we began to analyze the corneal epithelial cell cycle. The method was to extract the corneal epithelial cell from the corneal epithelial cell by mRNA extraction, tranquilizer and diazepam respectively. The real time PCR parsing line is available on the computer. The amount of Bone morphogenetic protein-7 messenger RNA is 0.391 times (t = 0.011) and intentionally low. The corneal tissue, Bone morphogenetic protein-7, immunostaining, immunostaining and immunostaining were used in the corneal tissue. In the year 2023, immunostaining was used to evaluate the condition and histology of Bone morphogenetic protein-7. Make sure that you can make sure that the epithelium and the epithelium of the cornea are not all right, and that the epithelium of the epithelium is used to make sure that you can use the method of treatment to make sure that you are not able to do so.