慢性移植片対宿主病マウスモデルを用いた角膜輪部機能不全と間葉上皮転換の関連の検討

点击翻译按钮获取中文摘要

２０２２年度もＣＯＶＩＤー１９感染の影響を受け、実験の進行が予定通り進めなかった。また、当初実験予定であった慶應義塾大学での慢性移植片対宿主病マウスモデルの作成が困難となり、自施設での研究を遂行した。本年度もアルカリ化学外傷モデルマウスを作成し、そのＢｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ－７の発現の評価を試みた。昨年度開発した角膜上皮細胞のみ回収して解析を行う方法を用いてアルカリ化学外傷モデルマウスの角膜上皮細胞からのｍＲＮＡ抽出を検討したところ、安定して採取が行えるようになった。その上でreal time PCR解析を行った。アルカリ化学外傷眼では対照群である非アルカリ化学外傷眼である僚眼に比べ、Ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ－７のｍｅｓｓｅｎｇｅｒ　ＲＮＡ発現量が０．３９１倍（ｔ検定　ｐ＝０．０１１）と有意に低下していた。これを裏付けるために角膜組織におけるＢｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ－７の免疫染色による証明を行ったが、凍結切片での免疫染色性が悪く、十分な根拠となっていない。２０２３年度に免疫染色法を条件検討し、組織学検討によるＢｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ－７の発現の証明を行っていきたい。この証明がされると、角膜輪部機能不全における上皮間葉転換の関与、またそこに注目した間葉上皮転換を利用した治療法の確立につながると考える。