ルシフェラーゼ発現トランスジェニックマウスを用いた新規皮膚感作性試験法の構築

荧光素酶表达转基因小鼠皮肤致敏试验新方法的构建

• 批准号: 19K19413
• 负责人: 井戸 章子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Gifu Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K19413/
• 关键词: 皮膚感作性試験; Local Lymph Node Assay; OECDテストガイドライン; 動物愛護; リンパ球; T細胞; 代替法

近年、動物愛護の観点から動物実験の適切な施行の国際原則である3R（Replacement・Reduction・Refinement）の推進が強く求められているが、動物を用いない代替法のみで化学物質等の安全性を評価するには問題点が多く、Replacementを除く2Rを強く反映したin vivo試験法の開発が必要である。経済協力開発機構（OECD）のテストガイドライン（TG）に掲載されているLocal Lymph Node Assay (LLNA)は、化学物質等の皮膚感作性のリスクをマウスで予測できる優れた方法である。しかし従前の試験法よりも実験動物へのストレスは少ないものの、最終的に動物を屠殺しなければならず、動物愛護の面でまだ改善すべき問題が多い。本研究では、我々が独自に作成した、リンパ球でルシフェラーゼを高発現しているトランスジェニック（Luc-TG）マウスとin vivoイメージング技術を用いた試験法を新たに確立し、この難題解決を目指す。2020年度は、既知の感作性物質を用いて、Luc-TGマウスのLLNAにおける応答性を確認した。本来OECD-TG429において、LLNAで使用するマウス系統はCBA/CaあるいはCBA/J系が推奨されている。しかし我々が作製したLuc-TGマウスは、免疫研究や免疫毒性試験のツールとして用いるためにBALB/c系統に戻し交配している。そのため、このLuc-TGマウスを用いたLLNAにより、化学物質の皮膚感作性が正確に評価できるかを検討した。その結果、今回用いた極強度感作性物質の2,4-ジニトロクロロベンゼン（DNCB）、軽度感作性物質のα-ヘキシルシンナミックアルデヒド（HCA）ともに既報と同等の結果を示した。よって、Luc-TGマウスはLLNAにおいて化学物質の皮膚感作性を正確に評価できることが示された。

In recent years, there has been a strong push for the implementation of international principles for animal care, such as 3R (Replacement, Reduction, Refinement), and safety evaluation of chemical substances in animal use. The OECD's Global Lymph Node Assay (LLNA) provides a methodology for predicting skin sensitivity to chemicals and other substances. In the past, we have tried to improve the quality of animals, and we have tried to improve the quality of animals. This study aims to establish a new method for solving problems in vivo management technology by means of trial and error analysis. In 2020, the use of known sensitive substances, Luc-TG and LLNA were confirmed. Originally, OECD-TG429 was used in the CBA/CA system. The BALB/C system is used for immune research and immunotoxicity testing. Luc-TG is used to evaluate the skin sensitivity of chemicals. The same results were reported for the 2,4-diamino-3-nitrobenzene (DNCB) and the α-diamino-3-nitrobenzene (HCA), which were used in the present study. Luc-TG is the most sensitive chemical in LLNA.

项目成果

Occurrence of fibrates and their metabolites in source and drinking water in Shanghai and Zhejiang, China.

• DOI: 10.1038/srep45931
• 发表时间: 2017-04-12
• 期刊: Scientific reports
• 影响因子: 4.6
• 作者: Ido A;Hiromori Y;Meng L;Usuda H;Nagase H;Yang M;Hu J;Nakanishi T
• 通讯作者: Nakanishi T

In vivo profiling of 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin-induced estrogenic/anti-estrogenic effects in female estrogen-responsive reporter transgenic mice.

• DOI: 10.1016/j.jhazmat.2019.121526
• 发表时间: 2019-10
• 期刊: Journal of hazardous materials
• 影响因子: 13.6
• 作者: Ichiro Yoshida;K. Ishida;Hiroshi Yoshikawa;S. Kitamura;Youhei Hiromori;Yasushi Nishioka;A. Ido

有機スズ化合物による胸腺萎縮作用とその誘導機構に関する検討

有机锡化合物胸腺萎缩作用及其诱导机制研究

• 发表时间: 2020
• 作者: 白石絵里奈;高野恭平;松丸大輔;井戸章子;永瀬久光;中西 剛
• 通讯作者: 中西 剛

軟骨魚類Leucoraja erinaceaにおけるペルオキシソーム増殖因子活性化受容体(PPAR) に対する有機スズ化合物の応答性評価

评估有机锡化合物对软骨鱼白斑鱼过氧化物酶体增殖物激活受体 (PPAR) 的反应性

• 发表时间: 2020
• 作者: 廣森洋平;石井陽一郎;松丸大輔;井戸章子;永瀬久光;L. Filipe C. CASTRO;中西 剛
• 通讯作者: 中西 剛

リポカリン分子C8γの重金属毒性防御機構の解明に向けて：重金属結合性の検討

阐明脂质运载蛋白分子C8γ的重金属毒性防护机制：重金属结合特性的检查

• 发表时间: 2020
• 作者: 山本勝也;椿原伊織;井戸章子;永瀬久光;松丸大輔;中西 剛
• 通讯作者: 中西 剛