内因性TCRおよびMHC発現を抑制した非自己T細胞によるT細胞輸注療法の開発

使用抑制内源性 TCR 和 MHC 表达的非自身 T 细胞开发 T 细胞输注疗法

• 批准号: 19K23919
• 负责人: 岡田 怜美
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-08-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K23919/
• 关键词: 輸注療法; 宿主組織傷害; 拒絶; 腫瘍免疫; TCR

本研究の目的は、非自己T細胞を用いたT細胞療法の確立であり“宿主組織傷害”と“輸注細胞の拒絶”を抑制した細胞の開発である。すなわち、輸注細胞である非自己T細胞の内因性TCRの発現を抑制することで宿主組織傷害を抑制し、さらに輸注細胞のMHC発現を抑制することで拒絶を抑制することを目的とする。本研究ではがん精巣抗原であるNY-ESO-1抗原をターゲットとし、ヒトリンパ球にNY-ESO-1特異的TCRを遺伝子導入した。内因性TCRの発現を抑制するsiRNAを搭載させたレトロウイルスベクターを用いることで、同時に内因性TCRの発現を抑制させることが可能であった。また、MHC classⅠ分子の発現の抑制はβ2ミクログロブリンをターゲットとし、レンチウイルスベクターを用いたCRISPR/Cas9システムにより行った。これら2種類のウイルスベクターを導入することで、内因性TCRおよびMHC発現をともに抑制し、かつNY-ESO-1特異的TCRを発現したリンパ球を作製することができた。2種類のウイルスベクターを共に導入できた細胞の割合は低く、ビーズ分離法によるセレクションを行うことで、高純度の遺伝子導入細胞を作製した。この遺伝子導入細胞をin vitroで評価し、アロ抗原に対する反応性の低下、さらに抗原性の低下を認めた。またサイトカイン産生にて抗腫瘍効果を評価し、遺伝子導入細胞での効果的な抗腫瘍効果を示した。この遺伝子導入細胞の抗腫瘍効果をマウスモデルを用いて検討した。免疫不全マウスにNY-ESO-1発現ヒト癌細胞株であるNW-MEL-38を皮下投与し、同時に遺伝子導入細胞を輸注した。輸注後、腫瘍体積を測定すると遺伝子導入細胞を輸注したマウスでは腫瘍増大を抑制することができた。これらの研究成果の論文作成を行っている。

The purpose of this study is to establish the use of non-self T cells in T cell therapy and to establish the "host tissue damage" and "rejection of infused cells" and to suppress the development of cells.すなわち、Injection of cells であるNon-self T cells のIntrinsic TCR の発appearance をSuppression することでHost tissue damageをSuppression of し, さらにThe appearance of MHC in the infused cells をSuppression of することでRejection of することをPurpose of とする. In this study, NY-ESO-1 antigen NY-ESO-1 antigen NY-ESO-1 antigen をターゲットとし and ヒトリンパball NY-ESO-1 specific TCR した were introduced. Intrinsic TCR suppressor siRNA equipped with siRNA It is possible to use the method and suppress the occurrence of endogenous TCR at the same time.また、MHC ClassⅠmolecules are suppressed and suppressedンチウイルスベクターを Use いたCRISPR/Cas9 システムにより行った.これら2 kinds of のウイルスベクターを imported することで, endogenous TCR およびMHC 発 appear をともThe TCR that inhibits and suppresses NY-ESO-1 is produced by TCR. 2 types of のウイルスベクターを合にIntroduced into できたcells and cut together and separated The method is a high-purity, high-purity, high-purity, high-purity, high-purity, high-purity, high-quality, high-quality, high-quality product. When the この缝子 is introduced into the cells, it is evaluated in vitro, and when the アロantigen is reduced, the reactivity is reduced, and when the さらにantigenicity is reduced, it is recognized. The anti-tumor effect of またサイトカイン has been shown. The anti-tumor effect of the この缝子 introduced into the cells is achieved by using the いて検した. Immunocompromised NY-ESO-1 cancer cell line NW-MEL-38 was administered subcutaneously and infused into the cells simultaneously. After the infusion, the volume of the tumor was measured and the cells were introduced into the tumor. The infusion was used to control the growth of the tumor and to suppress the growth of the tumor. A paper based on the results of the research was written by を行っている.

项目成果

Possibility of future clinical application of adoptive cell therapy with allogeneic T cells deficient in endogenous TCR and HLA class I molecules for digestive cancer patients

缺乏内源性 TCR 和 HLA I 类分子的同种异体 T 细胞的过继细胞治疗未来临床应用于消化道癌症患者的可能性

• 发表时间: 2019
• 作者: Satomi Okada;Mitsuhisa Takatsuki;Daisuke Muraoka;Kiyoshi Yasui; Sachiko Okamoto;Junichi Mineno;Hiroshi Shiku;Hiroaki Ikeda;Susumu Eguchi
• 通讯作者: Susumu Eguchi