Are Processed peptides of procalcitonin and/or presepsin able to become novel biomarkers for sepsis?

降钙素原和/或 presepsin 的加工肽能否成为脓毒症的新型生物标志物？

• 批准号: 19K23953
• 负责人: 濱田 悦子
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Bunkyo Gakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-08-30 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K23953/
• 关键词: プロカルシトニン; プレセプシン; 敗血症; 敗血症マーカー; プロセスドペプチド

現在、プロカルシトニンとプレセプシンが敗血症のバイオマーカーとして日常臨床検査で使用されているが、もっと特異性を上げて、細菌感染症、それ以外の原因など、病態によって鑑別できる方法に改良することが望まれる。本研究は、その方法論として、病態・重篤度特異的なプロセッシングされたペプチドがあると仮定し、それを探索し、新しいバイオマーカーとなりうるかどうかを検討することを目的としている。研究方法は、①検討用試料として、プロカルシトニン、プレセプシンが高値を示したヒト血清・血漿を得て（研究協力者：前任地である浜松医科大学医学部附属病院）、ヒツジ抗マウスIgG抗体を物理吸着により固相化した磁性ビーズをマウス抗プロカルシトニン抗体もしくは抗プレセプシン抗体の溶液と混合させ、両者のアフィニティ吸着ビーズを作製する。②両者のアフィニティ吸着ビーズと両者の高値試料とをインキュベートすることで、プロカルシトニンおよびプレセプシンの分子を捕捉する。③磁気ビーズを洗浄後、溶出してmatrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS)で解析する。④病態に特異的なピーク、もしくは予後推定に関係するピークを探索し、それをMS-MSでアミノ酸配列を解析し、どの部分のペプチドかを確認し、多数症例で同様に解析し意義づけを行う。⑤最終的な目標として、細菌感染症に特異的なピークに対して特異的なモノクローナル抗体を作製し、新たなイムノアッセイ系を確立する。現在は①を遂行している。効率よくアフィニティ吸着をさせる抗体および検体濃度を決定する必要があるが、新たな試みであることに加え、新型コロナウイルスの影響で施設間移動に制限があったため、時間を要している。②③は方法論が確立しているため、①よりは順調に進むと予想される。④は時間が解決すると推測している。

Now, プ ロ カ ル シ ト ニ ン と プ レ セ プ シ ン が sepsis の バ イ オ マ ー カ ー と し て check daily clinical 検 で use さ れ て い る が, も っ と specificity on を げ て, bacterial adapting just-in-time inventory, そ れ の beyond reason な ど, pathological に よ っ て identify で き る method modified す に る こ と が hope ま れ る. Methodology this study は, そ の と し て, pathological degree of heavy Benedict specific な プ ロ セ ッ シ ン グ さ れ た ペ プ チ ド が あ る と 仮 し, そ れ を explore new し し, い バ イ オ マ ー カ ー と な り う る か ど う か を beg す 検 る こ と を purpose と し て い る. は research method, (1) 検 please use sample と し て, プ ロ カ ル シ ト ニ ン, プ レ セ プ シ ン が high numerical を shown し た ヒ ト serum, plasma を て (study together: Former to で あ る pine medical university affiliated hospital medical department), the city ヒ ツ ジ resistance マ ウ ス IgG antibody を physical sorption に よ り solid phase change し た magnetic ビ ー ズ を マ ウ ス resistance プ ロ カ ル シ ト ニ ン antibody も し く は resistance プ レ セ プ シ ン antibody と の solution mixed さ せ, struck の ア フ ィ ニ テ ィ sorption ビ ー ズ を cropping す る. (2) struck is の ア フ ィ ニ テ ィ sorption ビ ー ズ と struck is の high numerical sample と を イ ン キ ュ ベ ー ト す る こ と で, プ ロ カ ル シ ト ニ ン お よ び プ レ セ プ シ ン の molecular を capture す る. ③ Magnetic gas ビ ビ ズを ズを after washing, dissolution of <s:1> matrix-assisted laser desorption/ionization-time of light mass spectrometry (MALDI-TOF MS)で analysis する. (4) pathological に specific な ピ ー ク, も し く は presumption to after に masato is す る ピ ー ク を exploring し, そ れ を MS -ms で ア ミ ノ acid with column を analytical し, ど の part の ペ プ チ ド か を confirm し, most cases で with others に parsing し meaning づ け う を line. (5) the final な target と し て, bacteria, adapting just-in-time inventory に specific な ピ ー ク に し seaborne て specific な モ ノ ク ロ ー ナ ル し the antibody を cropping, new た な イ ム ノ ア ッ セ を イ department establish す る. Now を ①を executes て て る る. Working rate よ く ア フ ィ ニ テ ィ sorption を さ せ る antibody お よ び 検 body concentration を decided す る necessary が あ る が, new た な try み で あ る こ と に え, new コ ロ ナ ウ イ ル ス の influence で facilities between the limitations of mobile に が あ っ た た め, time を し て い る. ②③ The が methodology が establishes the て るため るため るため, ① the よ and て are in a conological sequence に to むと and then to される. ④ が time が solve すると speculation て て る る.