交配試験によるアスペルギルスの種の概念と抗真菌薬耐性株拡散の検討

Aspergillus fumigatus 関連種はアスペルギルス症の原因菌で, 治療の第一選択薬であるボリコナゾール (VRCZ) やイトラコナゾール (ITCZ) に対して耐性を持つことが医療上問題視されているが, その耐性機序については明らかになっていない.そこで, 本研究では交配後の最小生育阻止濃度 (MIC) の変遷を検討し, 交配による耐性獲得の可能性を解明することを目的とする.千葉大真菌センター保存のA. udagawae, A. pseudoviridinutans, A. felis, A. wyominensis の臨床及び環境株を使用した. まず交配型 (MAT1-1-1, MAT1-2-1) の判別を行い,　相対する交配型で分子系統的に種内、種間の菌株を選択して交配試験を行った. 交配後, 子孫株の分生子を調整し, MICを測定した. また遺伝子組み換えの有無の確認はβ-tubulin 配列と交配型で行った.供試菌株の交配型はほぼ1:1 に分布していることが確認されたが，A. pseudoviridinutansの臨床株ではMAT1-1-1のみが見られた. 交配試験では同種内で交配が見られたのは, A. felis のみだったため，本種の子孫株でのMIC を測定した. VRCZ 耐性株間の交配では，約95% の子孫株で耐性が確認され, 耐性機序の保存が示唆された. VRCZ 耐性株と感受性株の子孫株では中間値のMIC を示す株が約55% 見られた. これらの子孫株では遺伝子の組み換えが確認できた. ITCZ のMIC が2 管離れている株間の交配では，75% の子孫株で耐性の親株と同等のMICか, それ以上のMIC が計測され，交配後耐性株の割合が増加している例も確認された. 以上の結果より，耐性に関わる遺伝子が一つではない可能性が示唆された．

Aspergillus fumigatus 関連種はアスペルギルス症の原因菌で, 治療の第一選択薬であるボリコナゾール (VRCZ) やイトラコナゾール (ITCZ) に対して耐性を持つことが医療上問題視されているが, その耐性機序については明らかになっていない.そこで, 本研究では交配後の最小生育阻止濃度 (MIC) の変遷を検討し, 交配による耐性獲得の可能性を解明することを目的とする.千葉大真菌センター保存のA. udagawae, A. pseudoviridinutans, A. felis, A. wyominensis の臨床及び環境株を使用した. まず交配型 (MAT1-1-1, MAT1-2-1) の判別を行い,　相対する交配型で分子系統的に種内、種間の菌株を選択して交配試験を行った. 交配後, 子孫株の分生子を調整し, MICを測定した. また遺伝子組み換えの有無の確認はβ-tubulin 配列と交配型で行った.供試菌株の交配型はほぼ1:1 に分布していることが確認されたが，A. pseudoviridinutansの臨床株ではMAT1-1-1のみが見られた. 交配試験では同種内で交配が見られたのは, A. felis のみだったため，本種の子孫株でのMIC を測定した. VRCZ 耐性株間の交配では，約95% の子孫株で耐性が確認され, 耐性機序の保存が示唆された. VRCZ 耐性株と感受性株の子孫株では中間値のMIC を示す株が約55% 見られた. これらの子孫株では遺伝子の組み換えが確認できた. ITCZ のMIC が2 管離れている株間の交配では，75% の子孫株で耐性の親株と同等のMICか, それ以上のMIC が計測され，交配後耐性株の割合が増加している例も確認された. 以上の結果より，耐性に関わる遺伝子が一つではない可能性が示唆された．