植物における窒素飢餓応答の分子基盤

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研究実施計画に記載した①窒素飢餓応答制御に関わる新奇因子の探索（変異体スクリーニングとYeast one-hybridスクリーニング）と②新奇・既知因子の役割と因子間の遺伝的関係の明確化によるシステム理解に関して、①を中心に推進した。①変異体のスクリーニングにおいては、昨年度単離した５系統の恒常的窒素飢餓応答変異体（cnsr）について、戻し交配を行い、原因変異同定のためのゲノムリシークエンス解析の準備を整えた。また、窒素飢餓条件で栽培しているにもかかわらず、窒素飢餓応答レポーターが活性化されない窒素飢餓応答抑圧変異体（snsr）のスクリーニングを行い（10,000系統相当のM2種子）、1次スクリーニングの結果114個体の変異体候補を得た。Yeast One-hybridスクリーニングでは、NRT2.4プロモーター上の窒素飢餓応答最小領域（NRT2.4minP）と相互作用する転写因子群NIPsを単離した。また、シロイヌナズナ葉肉プロトプラスを用いたトランジェントアッセイにより、NIPsは植物体内においてもNRT2.4minPと相互作用することを確認した。②窒素飢餓応答制御に関わるとされる既知因子NIGT1.1-1.4、LBD37-39、CEPDs、NLA、CBL7、BTB1/2について、変異体の入手または作製を完了した。また、NIGT1.1-1.4とLBD37-39については、それぞれの多重変異体を組み合わせた７重変異体を作出した。