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最終糖化産物がウシ子宮、卵管および胚発育に及ぼす影響とその作用機序の解明

阐明晚期糖基化终产物对牛子宫、输卵管和胚胎发育的影响及其作用机制

基本信息

批准号：
20H03129
负责人：
松山秀一
金额：
$ 11.32万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H03129/
关键词：
メチルグリオキサール牛子宮卵管低受胎

项目摘要

本研究では、高穀物含量の飼料によって産生されるメチルグリオキサール（MGO）が乳牛における受胎率低下の一因となっていることを検証する。本年度は、ウシ子宮内膜培養細胞へのMGO添加がDNA損傷を誘発するか、炎症に関わるNFkBやIL-8の発現を亢進するかについて検討した。また、ウシ静脈内へのMGO投与が子宮内膜における細胞老化を誘導するかについても検討した。ウシ子宮内膜上皮細胞および間質細胞の培養液中にMGOを0、0.１、1 mMとなるように添加し12時間培養した後、DNA損傷マーカーであるγH2AXタンパクと炎症に関連するNFkB p65タンパクの発現量、IL-8分泌量を測定した。また、ウシ静脈内にMGO（5 mmol/h, 2 h/d）を9日間投与し、子宮内膜組織のSA β-gal陽性細胞数、老化細胞のマーカー遺伝子（p21, p53, p16）およびミトコンドリアの融合や分裂に関わる遺伝子（TFAM, FIS1, MFN1, NRF1）のmRNA発現を測定した。γH2AXタンパク発現量はMGO 1 mM処置区において対照区およびMGO 0.1 mM処置区と比較して有意に増加したことから、ウシ子宮内膜間質細胞においてMGOがDNA損傷を引き起こすことが示された。ウシ子宮内膜上皮細胞および間質細胞におけるNFkB p65タンパク発現量、IL-8分泌量は各処置区間で有意差は認められなかったことから、MGO添加後12時間では炎症反応は惹起されないことが示された。また、子宮内膜組織におけるSA β-gal陽性細胞割合、p21、p53、p16 mRNAおよびTFAM, FIS1, MFN1, NRF1 mRNA発現はMGO投与による変化は見られなかった。これらの結果から、MGOの静脈内投与は投与期間９日間という非常に短い期間であったため細胞老化が誘導されなかった可能性が考えられた。

In this study, high-grain-content feedstuffs were used to produce high-quality feeds. (MGO) One of the reasons for the low pregnancy rate of dairy cows is the low pregnancy rate of dairy cows. This year, the endometrial cultured cells were added to MGO, which caused DNA damage and inflammation, and NFkB and IL-8 were added to the cells. Injection of intravenous MGO into the lining of the uterus can induce aging of endometrium cells.ウシEndometrial epithelial cells and stromal cells culture medium にMGOを0, 0.1, 1 After 12 hours of incubation with the addition of mM となるように, DNA damage マーカーであるγH2AX タンパクと inflammation is related to NFkB The amount of p65 protein and the amount of IL-8 secreted were measured.また, ウシ intravenous MGO (5 mmol/h, 2 h/d) を9 daytime administration し, number of SA β-gal positive cells in endometrial tissue, senescent cells のマーカー缝子 (p21, p53, p16) およびミトコンドリアのfusion cleavage に关わる伝子(TFAM, FIS1, MFN1, NRF1) のmRNA 発appears and is measured. γH2AX タンパク発existing amountはMGO 1 mM disposal area において対毬区およびMGO 0.1 The treatment area of mM is the comparison of the intentional increase and the increase of the endometrial stromal cells, and the DNA damage of the endometrial stromal cells. Endometrial epithelial cells, stromal cells, NFkB There is an intentional difference between the treatment intervals of p65 protein levels and IL-8 secretion levels. 12 hours after the addition of MGO, the inflammatory reaction caused by たことから and MGO showed された. Endometrial tissue, β-gal positive cell excision, p21, p53, p16 mRNA, TFAM, FIS1, MFN1, NRF1 mRNA expression, MGO injection, による剉化は见られなかった. The result of これらのから、MGOのIntravenous administrationはAdministration period９DaytimeというveryにThe possibility of inducing cellular aging in a short period of time is also considered.