最終糖化産物がウシ子宮、卵管および胚発育に及ぼす影響とその作用機序の解明

阐明晚期糖基化终产物对牛子宫、输卵管和胚胎发育的影响及其作用机制

基本信息

批准号：
20H03129
负责人：
松山秀一
金额：
$ 11.32万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H03129/
关键词：
メチルグリオキサール牛子宮卵管低受胎

项目摘要

本研究では、高穀物含量の飼料によって産生されるメチルグリオキサール（MGO）が乳牛における受胎率低下の一因となっていることを検証する。本年度は、ウシ子宮内膜培養細胞へのMGO添加がDNA損傷を誘発するか、炎症に関わるNFkBやIL-8の発現を亢進するかについて検討した。また、ウシ静脈内へのMGO投与が子宮内膜における細胞老化を誘導するかについても検討した。ウシ子宮内膜上皮細胞および間質細胞の培養液中にMGOを0、0.１、1 mMとなるように添加し12時間培養した後、DNA損傷マーカーであるγH2AXタンパクと炎症に関連するNFkB p65タンパクの発現量、IL-8分泌量を測定した。また、ウシ静脈内にMGO（5 mmol/h, 2 h/d）を9日間投与し、子宮内膜組織のSA β-gal陽性細胞数、老化細胞のマーカー遺伝子（p21, p53, p16）およびミトコンドリアの融合や分裂に関わる遺伝子（TFAM, FIS1, MFN1, NRF1）のmRNA発現を測定した。γH2AXタンパク発現量はMGO 1 mM処置区において対照区およびMGO 0.1 mM処置区と比較して有意に増加したことから、ウシ子宮内膜間質細胞においてMGOがDNA損傷を引き起こすことが示された。ウシ子宮内膜上皮細胞および間質細胞におけるNFkB p65タンパク発現量、IL-8分泌量は各処置区間で有意差は認められなかったことから、MGO添加後12時間では炎症反応は惹起されないことが示された。また、子宮内膜組織におけるSA β-gal陽性細胞割合、p21、p53、p16 mRNAおよびTFAM, FIS1, MFN1, NRF1 mRNA発現はMGO投与による変化は見られなかった。これらの結果から、MGOの静脈内投与は投与期間９日間という非常に短い期間であったため細胞老化が誘導されなかった可能性が考えられた。

这项研究研究了高谷物含量饲料产生的甲基甘氨酸（MGO）有助于乳头奶牛的受孕率降低。今年，我们研究了在培养的牛子宫内膜细胞中添加MGO是否会诱导DNA损伤或增强与炎症有关的NFKB和IL-8的表达。我们还研究了MGO在牛静脉中的施用是否会诱导子宫内膜的细胞衰老。将MGO添加到牛子宫内膜上皮细胞和基质细胞的培养基中，达到0、0.1和1 mM，并培养12小时，并测量DNA损伤标记γH2AX蛋白的表达水平以及与炎症相关的NFKB P65蛋白的表达水平。 Additionally, MGO (5 mmol/h, 2 h/d) was administered in bovine veins for 9 days to measure the number of SA β-gal-positive cells in endometrial tissue, marker genes of senescent cells (p21, p53, p16) and genes involved in mitochondrial fusion and division (TFAM, FIS1, MFN1, NRF1).与对照区和MGO 0.1 mM处理的截面相比，MGO 1 MM处理的截面中γH2AX蛋白表达水平显着提高，表明MGO在牛子宫内膜基质细胞中引起DNA损伤。在牛子宫内膜上皮细胞中NFKB p65蛋白的表达水平和IL-8分泌水平没有显着差异，治疗部分之间的基质细胞没有显着差异，这表明在MGO添加后12小时诱导了炎症反应。此外，在子宫内膜组织，p21，p53，p16 mRNA和TFAM，FIS1，MFN1，NRF1 mRNA表达中，在子宫内膜组织中的SAβ-GAL阳性细胞百分比中未观察到任何变化。这些结果表明，静脉注射MGO是非常短的9天，因此未诱导细胞衰老。