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天然ステルスエキソソームの解析とデリバリーキャリア開発への応用

天然隐形外泌体的分析及其在运输载体开发中的应用

基本信息

批准号：
20H04533
负责人：
高橋有己
金额：
$ 11.32万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H04533/
关键词：
細胞外小胞エキソソーム血中滞留性

项目摘要

細胞から分泌される膜小胞であるエキソソームは脂質二重膜により形成された細胞外小胞であり、その生理機能に注目が集まるとともにデリバリー応用が期待される。これまでに、培養細胞から回収したエキソソームの大部分はマクロファージ等の貪食細胞に取り込まれるためにその血中半減期は数分程度と極めて短いことが明らかとなっていた。最近、研究代表者らは、エキソソームの中にはマクロファージに認識されにくく、血中半減期が数時間～数日と非常に長いエキソソームが存在する可能性を示す結果を得た。本申請ではそのようなエキソソームを天然ステルスエキソソーム（NSExo）と名付け、その存在と物性・動態特性等について解析する。これらの検討を通じて、新規の細胞外小胞NSExoの詳細について明らかにするとともに、デリバリーキャリアの開発研究を行う。本年度は、NSExoのデリバリー応用を念頭に、NSExo産生細胞の培養上清からのNSExoの回収方法の確立について検討を行った。NSExoはその体内動態特性から有用なデリバリーキャリアになりえると考えられるが、その生産性は大きな問題点となる。そこで本年度はNSExoの生産性の改善を目的とした検討を行った。NSExoはホスファチジルセリン（PS）が少ないために負電荷が少ないエキソソームであるが、これを効率よく回収するために陰イオン交換クロマトグラフィーによる回収方法の開発について検討を行った。その結果、陰イオン交換クロマトグラフィーにより、効率的にNSExoを回収する方法の確立に成功した。

Cells secrete membrane cells and form lipid double membrane cells. The external small cells are the same as the physiological functions of the outer cells.これまでに, cultured cells and からrecovery したエキソソームのmost of the voracious cells such as はマクロファージにGET り込まれるためにそのblood half-reduced period は a few points と extremely めて SHORT いことが明らかとなっていた. Recently, the representative research representatives of the research, らは, エキソソームの中にはマクロファージに, met されにくく, blood. The half-period is a few days to a few days and is very long. It exists and the possibility shows and the result is obtained. This application is made of natural ステルスエキソソーム (N SExo) and analysis of names, existence, physical properties, dynamic characteristics, etc.これらの検问を通じて、新码の Extracellular small cells NSExoのDetailsについて明らかするとともに、デリバリーキャリアの开発研究を行う. This year, the idea of using NSExo and the recovery method of the culture supernatant of NSExo-producing cells have been established. NSExo's dynamic characteristics in the body are useful and useful, and the productivity is large and problematic. The purpose of this year's NSExo is to improve productivity. NSExoはホスファチジルセリン（PS）が小ないためにnegative charge が小ないエキソソームであるが、これをEfficiency よく recycling するために音イオン exchange クロマトグラフィーによる recycling method の开発について検椒行った.その results, Yin イオン exchange クロマトグラフィーにより, efficient にNSExo を recovery する method has been established successfully した.