グアノシン二リン酸(GDP)分解酵素E-NTPD6による腸管恒常性維持機構の解明

阐明二磷酸鸟苷 (GDP) 降解酶 E-NTPD6 维持肠道稳态的机制

基本信息

  • 批准号:
    20J20151
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.98万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2020
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2020-04-24 至 2023-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

GDP分解酵素E-NTPD6欠損マウスの機能解析を進めていたが、単独遺伝子欠損マウスでは有意な表現型を見いだせなかったため、別のヌクレオチド分解酵素に焦点を変更し研究を進めた。宿主細胞と細菌の細胞膜の大部分は、リン脂質・糖脂質・コレステロールにより構成されている。脂質および脂質の主成分である脂肪酸の一部は炎症および抗炎症メディエーターとして作用することが知られており、これらの代謝系を明らかにすることが、炎症制御機構の解明にも繋がる。ENPP7は小腸の上皮細胞に特異的に高発現しており、細胞膜構成成分の一つであるスフィンゴミエリンを分解することが知られている。しかし、管腔内のスフィンゴミエリンの代謝制御と腸内細菌叢や腸管免疫系の関連については解明されていないため、スフィンゴミエリン代謝制御による腸管恒常性維持機構の解明を目的とした。まず、免疫細胞へのスフィンゴミエリンの作用を検討した。ナイーブT細胞からTh1、Th17、制御性T細胞へ分化誘導する際に、スフィンゴミエリンを添加し、スフィンゴミエリンのT細胞分化に対する影響を評価したが、いずれも大きな有意差は見られなかった。更に、骨髄細胞から骨髄細胞由来マクロファージ/樹状細胞を誘導する際にスフィンゴミエリンを添加して、ミエロイド系細胞分化に対する影響も評価したが、有意差は見られなかった。次に腸管炎症に対する感受性を評価するため、野生型およびENPP7遺伝子欠損マウスにTNBS腸炎を誘導し、体重減少により炎症度を比較したところ、両群に有意差は認められなかった。今後は、ENPP7によるスフィンゴミエリン代謝が腸内細菌叢へ与える影響を評価するため、便および小腸内容物の脂質プロファイルをLC/MSによって、菌叢プロファイルをr16Sシークエンス解析によって検討し、両者のデータの相関を調べていく必要がある。
The function analysis of E-NTPD-6 enzyme is progressing. Most of the host cells and bacterial cell membranes are composed of lipids, glycolipids and lipids. Fatty acids, the main components of lipids, are part of the inflammatory and anti-inflammatory mechanisms that regulate inflammation. ENPP7 has a high level of specificity for small intestinal epithelial cells, and a high level of understanding of cell membrane components. Metabolic control of intestinal flora and intestinal immune system To investigate the role of immune cells in immune response. To evaluate the effects of the addition of Th1, Th17, and regulatory T cell differentiation on T cell differentiation. In addition, bone marrow cells are induced to differentiate into dendritic cells, and the effects of cell differentiation on bone marrow cells are evaluated. In addition, the sensitivity of intestinal inflammation was evaluated by wild-type and ENPP7 gene deficiency, TNBS enteritis induction, weight loss, inflammation, and group intentional difference. In the future, ENPP7 will evaluate the effects of metabolism on intestinal bacterial flora and intestinal lipid profile on LC/MS analysis of intestinal bacterial flora and intestinal lipid profile, and adjust the correlation between intestinal bacterial flora and intestinal lipid profile.

项目成果

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