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Thioacid-Based Strategy for the Glycoprotein Synthesis

基于硫代酸的糖蛋白合成策略

基本信息

批准号：
20J20649
负责人：
野村幸汰
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-24 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度はこれまでに開発した糖タンパク質合成法である糖鎖挿入法を用いて、32残基目のAsnに複合型型二分岐シアリル糖鎖を有するセリンプロテアーゼ阻害剤カザルタイプ13(SPINK13)の化学合成及びバイオアッセイを共同研究を含めて行った。SPINK13は各種細胞において抗癌活性が示唆されている化合物であり、現在までにSPINK13上の糖鎖の影響が研究された事例は無いことから、本研究では糖鎖の有無による抗癌活性の評価を検討した。ヒト癌細胞株であるhuman hapatoma cell (Huh7), human pancreatic cancer cell (PSN-1) 及び非癌細胞株であるhuman embryonic kidney cell (HEK293)に対して、糖鎖が結合したSPINK13及び糖鎖が結合していないSPINK13を作用させることで、各細胞の増殖能力及び細胞外マトリックス中での浸潤能力を測定した。本研究は大阪大学医学研究科の三善先生との共同研究として行った。その結果、糖鎖の有無に関わらず、いずれの細胞においてもSPINKの有無で細胞の増殖活性は変化しなかった。一方、癌細胞の細胞マトリックス中での浸潤能力は糖鎖の有無によって変化することが解明された。糖鎖がある場合に比べ、糖鎖がない場合のSPINK13を用いた実験では、より癌細胞の浸潤能が低下したことから、癌細胞の浸潤阻害に対し糖鎖はネガティブな影響を与えることが判明した。Alpha Foldによるタンパク質構造シミュレーションを行った結果、癌細胞が周囲の細胞マトリックスを分解する際に発現するプロテアーゼに対して、SPINK13が結合する場合に、結合サイトに糖鎖が付加されている可能性が示唆されたことから、生体内においてSPINK13上の糖鎖はいずれかの段階で除去される可能性がることが見出された。

This year はこれまでに open 発した sugar タンパク qualitative synthesis である lock scions into laws を sugar with いて, 32 residues の Asn に type compound binary toki シアリル sugar lock has すをるセリンプロテアーゼ resistance against tonic カザルタイプ 13 (SPINK13) の chemical synthesis and びバイオアッセイを joint research を containing めて line った. SPINK13 は various cell においがて antitumor activity in stopping されている compound であり, now までに SPINK13 の sugar lock の influence on が research された examples は no いことから, this study では sugar lock の presence of によのる antitumor activity evaluation 価を beg し検た. Youdaoplaceholder0 cancer cell line であるhuman hapatoma cell (Huh7) human pancreatic cancer cell (PSN-1) and び non-cancer cell line であるhuman embryonic kidney cell (HEK293) にし seaborne て, sugar lock が combining した SPINK13 and び sugar lock がしていない SPINK13 を role させることで, each cell の good colonization ability and び extracellular マトリックス in での infiltration capacity determination of をした. This study was jointly conducted by Mr. Mitsuyoshi of the Graduate School of Medicine, Osaka University, とと, と, て, った. その results, sugar lock の presence of に masato わらず, いずれの cells においても SPINK の whether ではの raised breeding activity - the しなかった. One party, in the cancer cell <s:1> cells, トリッ, ス, ス, whether there is a で <s:1> infiltration ability <e:1>, and whether there is a によって change in the sugar lock <e:1>, する, <s:1>, とが, explain された. Sugar lock があにる occasion than べ, sugar lock がない occasions の SPINK13 を with いた be 験では, よりの infiltrates the tumor and low がしたことから, cancer cells の infiltration resistance against にし seaborne sugar lock はネガティブな influence を and えることが.at した. Alpha A Fold によるタンパク mass structure シミュレーションを line った results, the cancer cells が weeks 囲の cells マトリックスを decomposition する interstate に発 now するプロテアーゼにし seaborne て, SPINK13 が combining するに, combining サイトに sugar lock が plus されていがる possibility in stopping されたことから, born in vivo において S On PINK13, the <s:1> sugar lock <s:1> ずれずれ stage で, after eliminating the される possibility がる <s:1> とがとが, reveals された.