Identification of trace bioactive lipid, phosphatidic acid molecular species: approaching physiological significance of lipid diversities

痕量生物活性脂质、磷脂酸分子种类的鉴定：接近脂质多样性的生理意义

• 批准号: 20J21133
• 负责人: 星野 史規
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-24 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J21133/
• 关键词: ホスファチジン酸; 多価不飽和脂肪酸; SYNJ1; AP180; エンドサイトーシス; synaptojanin-1; パーキンソン病; ジアシルグリセロールキナーゼ

昨年度、18:0/22:6-PAはSYNJ1と結合してD4-ホスファターゼ活性を亢進することを報告した。そこで、今年度はSYNJ1と18:0/22:6-PAとの機能連関を細胞レベルで明らかにすることを目指した。まず、脳において18:0/22:6-PAを産生するDGKδとSYNJ1の神経細胞内局在を調べた。その結果、SYNJ1はDGKδが細胞質で形成する顆粒と強く共局在した。従って、SYNJ1はDGKδが産生する18:0/22:6-PAと細胞内で近接している可能性がある。今後は、神経細胞においてDGKδが産生する18:0/22:6-PAがSYNJ1のD4-ホスファターゼ活性を亢進するかを明らかにする。具体的には、SYNJ1が産生するPIPsをLC-MS/MSまたはPIPs抗体を用いて定量・検出し、細胞内SYNJ1活性を評価する。次に、クラスリンと相互作用してエンドサイトーシスを制御するAP180と18:0/22:6-PAとの相互作用について調べた。その結果、AP180は調べたリン脂質のうち、PAとPI(4,5)P2のみに強く結合した。さらに、AP180はPA分子種のうち、18:0/22:6-PAに最も強く結合した。エンドサイトーシスの制御において、AP180とクラスリンの相互作用が重要である。そこで、18:0/22:6-PAまたはPI(4,5)P2がAP180とクラスリンとの相互作用に影響するかを検証した。その結果、18:0/22:6-PAはAP180とクラスリンとの相互作用を阻害し、PI(4,5)P2は上記阻害効果を示さなかった。以上より、18:0/22:6-PAはAP180とクラスリンとの相互作用における負の調節因子として機能することがわかった。今後は、18:0/22:6-PAがAP180を標的にして、細胞レベルでエンドサートーシスが制御されるかについて明らかにする。

Last year, 18:0/22:6-PAはSYNJ1とcombinationしてD4-ホスファターゼActiveを Hyperactivityすることをreportした.そこで、This year's SYNJ1と18:0/22:6-PAとの Functional connection をcell レベルで明らかにすることを Eye finger した.まず、脳において18:0/22:6-PAをproduces するDGKδとSYNJ1の神経 localized in the cells and adjusts べた. As a result, SYNJ1 and DGKδ were formed in the cytoplasm and the particles were strongly colocalized. There is a possibility that SYNJ1 and DGKδ will be produced and close to 18:0/22:6-PA in the cell. From now on, the activity of DGKδ produced by DGKδ is high at 18:0/22:6-PAがSYNJ1D4-ホスファターゼ. Specifically, the production of SYNJ1 PIPs, LC-MS/MS, and PIPs antibodies were quantified using the method, and the activity of SYNJ1 in cells was evaluated. Time, クラスリンとinteraction してエンドサイトーシスをcontrol するAP180と18:0/22:6-PA とのInteraction について Adjustment べた.そのRESULTS, AP180 はべたリン Lipid のうち, PAとPI(4,5)P2 のみにstrong く合した.さらに, AP180はPA molecular species and のうち, 18:0/22:6-PA is the strongest and strongest combination.エンドサイトーシスのcontrolled control system, AP180 system interaction system is important.そこで、18:0/22:6-PAまたはPI(4,5)P2がAP180とクラスリンとのInteraction するかを検证した.その result, 18:0/22:6-PAはAP180とクラスリンとのinteraction and blocking effect, PI(4,5)P2 has a blocking effect as shown above. Above より, 18:0/22:6-PAはAP180とクラスリンとのinteraction におけるnegative のregulator としてfunction することがわかった.は、18:0/22:6-PAがAP180を Standard にして、Cellレベルでエンドサートーシスがcontrol されるかについて明らかにする.

项目成果

ホスファチジン酸の乳酸脱水素酵素Aとの相互作用および機能連関

磷脂酸与乳酸脱氢酶A的相互作用及功能关系

• 发表时间: 2020
• 作者: Tamura Hiroyuki;Ishikita Hiroshi;森太志;Ohtaka-Maruyama Chiaki;星野史規，坂根郁夫
• 通讯作者: 星野史規，坂根郁夫

Functional relationship between sphingomyelin synthase‐related protein and diacylglycerol kinase δ

鞘磷脂合酶相关蛋白与二酰甘油激酶δ之间的功能关系

• DOI: 10.1096/fasebj.2020.34.s1.02289
• 发表时间: 2020
• 期刊: The FASEB Journal
• 作者: Murakami Chiaki;Hoshino Fumi;Sakai Hiromichi;Hayashi Yasuhiro;Yamashita Atsushi;Sakane Fumio
• 通讯作者: Sakane Fumio

Palmitic acid- and/or palmitoleic acid-containing phosphatidic acids are generated by diacylglycerol kinase α in starved Jurkat T cells

饥饿的 Jurkat T 细胞中的二酰甘油激酶 α 产生含有棕榈酸和/或棕榈油酸的磷脂酸

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2020.02.162
• 发表时间: 2020
• 期刊: Biochemical and Biophysical Research Communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: Murakami Y;Murakami C;Hoshino F;Lu Q;Akiyama R;Yamaki A; Takahashi D;Sakane F.
• 通讯作者: Sakane F.

Cellular phosphatidic acid sensor, α-synuclein N-terminal domain, detects endogenous phosphatidic acid in macrophagic phagosomes and neuronal growth cones

细胞磷脂酸传感器，α-突触核蛋白 N 末端结构域，检测巨噬细胞吞噬体和神经元生长锥中的内源磷脂酸

• DOI: 10.1016/j.bbrep.2020.100769
• 发表时间: 2020
• 期刊: Biochemistry and Biophysics Reports
• 影响因子: 2.7
• 作者: Yamada Haruka;Hoshino Fumi;Lu Qiang;Sakane Fumio
• 通讯作者: Sakane Fumio

多価不飽和脂肪酸含有ホスファチジン酸はL-lactate dehydrogenase Aと選択的に相互作用し二次構造変化および不活性化を誘導する

含有多不饱和脂肪酸的磷脂酸选择性地与L-乳酸脱氢酶A相互作用并诱导二级结构变化和失活。

• 发表时间: 2020
• 作者: Takasaki Hironori;Ikeda Miho;Hasegawa Reika;Zhang Yilin;Sakamoto Shingo;Maruyama Daisuke;Mitsuda Nobutaka;Kinoshita Tetsu;Ohme-Takagi Masaru;星野史規，坂根郁夫
• 通讯作者: 星野史規，坂根郁夫