哺乳動物ｍRNAのキャップ構造特異的なN6メチルアデノシン修飾の生合成と機能解析

哺乳动物 mRNA 帽结构特异性 N6 甲基腺苷修饰的生物合成和功能分析

• 批准号: 20J30002
• 负责人: 穐近 慎一郎
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-24 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J30002/
• 关键词: RNA; キャップ; RNA結合タンパク質; RNA修飾

N6-メチルアデノシン(m6A)修飾は真核生物のmRNAに豊富な化学修飾であり、内部におけるm6A修飾はmRNAの安定性や翻訳を制御することで細胞の様々な機能に関与している。一方で脊椎動物では5'cap構造に続く1塩基にもm6A修飾が存在するが、その生合成や生理学的な意義は未解明であった。申請者はこれまでの研究過程において生合成を担う遺伝子(CAPAM)を同定し、cap構造におけるm6A修飾形成過程を解明した。また生理学的な意義として細胞の酸化ストレス応答に関与していること、およびm6A修飾がmRNAの翻訳効率を向上していることを見出した。本研究ではm6A修飾がどのような遺伝子の発現を制御することで細胞の酸化ストレス応答に寄与しているのか、またm6A修飾がどのような因子を介してmRNAの翻訳効率に寄与しているのかを解明することで、cap構造におけるm6A修飾の意義の解明を目指す。本年度は、m6A修飾がmRNAの翻訳効率に寄与する機構を解析するために、内在遺伝子の転写・翻訳機構を可能な限り正確に模倣したレポーター翻訳アッセイの系の構築に注力した。またこれを用いてm6A修飾を認識する候補因子の機能的関係性の探索を進めた。またCOVID-19の感染拡大に考慮して、新型コロナウイルスのRNAメチル化酵素の阻害剤の探索も並行して行った。共同研究を行い、すでに約20万化合物からのスクリーニングを終え、培養細胞において新型コロナウイルスの増殖を抑制する化合物を取得した。それらに関してより詳細な分子機構を明らかにするためにSPR測定および複合体のX線結晶構造解析を進めた。

N6-M6A modification is a chemical modification of eukaryotic mRNA, an internal modification of m6A mRNA stability, and a control of cellular function. The physiological significance of the presence of m6A modifications in vertebrate 5'cap structures remains unclear. The applicant has studied the process of synthesis and modification of CAPAM, cap structure and m6A. The physiological significance of this modification is revealed in the expression of mRNA. In this study, m6A modification was used to control the expression of mRNA, and m6A modification was used to explain the role of m6A modification in the expression of mRNA. This year, m6A modification of mRNA translation rate and mechanism analysis, internal gene translation mechanism, possible to accurately imitate the translation system construction attention To explore the relationship between candidate factors and their functions. The infection of COVID-19 was greatly considered, and new inhibitors of RNA enzymes were explored and implemented. About 200,000 compounds have been obtained from joint research on cell culture and cell culture to inhibit the proliferation of new cells. Detailed molecular structure analysis of SPR and X-ray crystallographic analysis of complexes

项目成果

月刊「細胞」2021年 12月号 エピトランスクリプトミクス

《细胞》月刊2021年12月号表观转录组学

• 发表时间: 2021
• 作者: 鈴木 勉

育志賞・青葉賞受賞 記念講演

生志奖/青叶奖纪念讲座

• 发表时间: 2020
• 作者: Ibrahim Marwa K.;Abdelhafez Tawfeek H.;Takeuchi Junko S.;Wakae Kosho;Sugiyama Masaya;Tsuge Masataka;Ito Masahiko;Watashi Koichi;El Kassas Mohamed;Kato Takanobu;Murayama Asako;Suzuki Tetsuro;Chayama Kazuaki;Shimotohno Kunitada;Muramatsu Masamichi;Aly Husse;Shinichiro Akicika
• 通讯作者: Shinichiro Akicika

新型コロナウイルスのRNAメチル化酵素を標的とした阻害剤スクリーニング

新型冠状病毒RNA甲基转移酶抑制剂筛选

• 发表时间: 2021
• 作者: Masaki Watanabe;Michiko Fujihara;Tomoharu Motoyama;Mayu Kawasaki;Shoya Yamada;Yuta Takamura;Sohei Ito;Makoto Makishima;Shogo Nakano;Hiroki Kakuta;川﨑真由;Yumiko Ohhashi;Shinichiro Akicika
• 通讯作者: Shinichiro Akicika

High-throughput screening of chemical inhibitors for SARS-CoV-2 RNA methyltransferase

SARS-CoV-2 RNA 甲基转移酶化学抑制剂的高通量筛选

• 发表时间: 2021
• 作者: Akichika;S.;Suzuki;T.;Suzuki;T.;Shinichiro Akicika
• 通讯作者: Shinichiro Akicika