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イネ根における4種類のアンモニウム輸送体の機能分担機構の解明

阐明水稻根部四种铵转运蛋白的功能共享机制

基本信息

批准号：
19J00190
负责人：
小西範幸
金额：
$ 5.99万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

1．これまでに、3種類のAMT1分子種 (AMT1;1, AMT1;2, AMT1;3) が遠心側の細胞膜に極性局在すること、および、ERにも局在することを見出した。しかし、これらの現象が引き起こされるメカニズムや生理的意義は不明なままである。極性局在にはリン酸化が関与しうること、AMT1の活性制御にC末端のリン酸化が関わることが知られていることから、AMT1;2の主要な細胞質領域であるC末端のリン酸化されうる8か所のアミノ酸残基に着目し、細胞内局在と活性の制御におけるリン酸化の影響を検討した。これら8アミノ酸にリン酸化または脱リン酸化を模倣した変異を導入した変異型AMT1;2-Flagをamt1三重変異体に導入し、Flagタグを用いた免疫染色で細胞内局在を、根におけるアンモニウム吸収実験で活性を評価した。これまでに検討したすべての変異型AMT1;2において、極性やER局在への明確な影響は見られなかった。一方、吸収活性に関しては、1アミノ酸の置換によって活性が著しく低下するリン酸化サイトを複数見出した。興味深いことに、1か所以上の残基でリン酸化模倣による活性低下がみられ、少なくとも2か所の残基で脱リン酸化模倣による活性低下がみられた。この結果から、複数のリン酸化と脱リン酸によって、AMT1;2の活性が細やかに調節される可能性が示唆された。2．これまでの解析でいずれの窒素条件でもamt2三重変異体は明確な表現型を示さなかった。amt2三重変異体ではAMT1分子種がAMT2の欠損を機能的に相補すると考え、amt1三重変異体にAMT2分子種の変異を加えた四重、五重、六重変異体を作出した。3． GS1と相互作用する膜タンパク質をGS1;2 promoter::GS1;2-Flagを導入したイネの根を用いた免疫沈降で探索したが、候補となる輸送体を見出すことができなかった。

1. Three species of AMT1 (AMT1;1, AMT1;2, AMT1;3) were found in the distal cell membrane polar region. The physiological significance of this phenomenon is unclear. the effect of acidification on the activity of AMT1 and its major cytoplasmic domains was investigated. 8-Flag-free acid, 2-Flag-free acid, 2-Flag-free acid, 3-Flag-free acid, 3- This is the first time that we've seen the impact of this change. One side, absorption activity related, 1, acid replacement activity related, 2, acid replacement activity related, 1, acid replacement activity related, 1, acid replacement activity related, 2, acid replacement activity related, 1, acid replacement activity related, 1, acid replacement activity related, 2, acid replacement activity related, 1, acid replacement activity related, 2, acid replacement activity related, 1, acid replacement activity related, 1, acid replacement activity related, 2, acid replacement activity related, 1, acid replacement activity related, 2, acid replacement activity related, 1, acid replacement activity related, 2, acid replacement activity related, 1, acid replacement activity related, 2, acid replacement activity related, 2, acid replacement activity related, 3, acid replacement activity related, 2, acid replacement activity related, 3, acid replacement activity related, 2, acid replacement activity related, 3, acid replacement activity related, 4, acid replacement activity related, 3, acid replacement activity related, 4, acid replacement activity related, acid replacement activity related, The activity of the above residues is low, and the activity of the above residues is low The results showed that the activity of AMT1;2 was regulated by the complex acid. 2. The analysis of the expression of the gene in the expression of the gene. AMT2 triple variant AMT1 molecular species AMT2 deficiency function complement each other, amt1 triple variant AMT2 molecular species variant four, five, six variant 3. GS1;2 promoter::GS1;2-Flag: :

项目成果

期刊论文数量（10）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

クラスリン依存性エンドサイトーシスはイネのミネラル輸送体の偏在に関与しない

网格蛋白依赖性内吞作用与水稻中矿物质转运蛋白的普遍存在无关

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
小西範幸;馬建鋒
通讯作者：
馬建鋒

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DOI：
10.1093/pcp/pcac032
发表时间：
2022
期刊：
Plant and Cell Physiology
影响因子：
4.9
作者：
Konishi Noriyuki;Huang Sheng;Yamaji Naoki;Ma Jian Feng
通讯作者：
Ma Jian Feng

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DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
小西範幸;馬建鋒
通讯作者：
馬建鋒

イネケイ酸輸送体Lsi1の偏在は複数領域によって制御される

水稻硅酸盐转运蛋白 Lsi1 的普遍分布受多个区域控制

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
小西範幸・馬建鋒
通讯作者：
小西範幸・馬建鋒

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DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Huang;S.;Konishi;N.;Yamaji;N.;Mitani-Ueno;N. and Ma;J. F.
通讯作者：
J. F.

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