器官培養法を用いたin vitroヒト精子形成系の開発

利用器官培养法开发体外人类精子发生系统

• 批准号: 19J01276
• 负责人: 松村 貴史
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J01276/
• 关键词: 男性不妊; 精子形成; 器官培養

本研究では、マウスにおいて確立された精巣の器官培養によるin vitro精子形成系をヒトへ応用することを目的とした。しかし現在のマウス培養系を用いたヒト組織の培養では1-2週間ほどで高度に線維化してしまい、その後の培養継続が難しかった。加えて、現在までマウス以外の哺乳類では、体外で分化させた生殖細胞から次世代個体を作出した例は報告されていない。そこで我々は、マウスのみに適合する精巣培養系を他の哺乳類にも応用するべく、ラットを対象として実験を行ってきた。前年度までに我々は培養法や培養液の検討を繰り返し、培養中の酸素濃度やホルモン類の添加などがラットのin vitro精子形成系開発において、未分化なラット雄性生殖細胞を半数体である円形精子細胞まで分化させることに成功した。本年度は、培養系のさらなる最適化のために、半数体まで分化した生殖細胞に特徴的な先体構造にGFPが集積するトランスジェニックラットを導入して実験を行った。また、培養中の培地に含まれるメタボライトの経時的変化のデータを取り培養液の改善を試みた。メタボロミクス解析の有用性はいまだはっきりと見出すことはできていないものの、様々な試行錯誤の末に伸長精子様の細胞までの分化と、分化誘導した円形精子細胞を用いた顕微授精によりラット産仔を作出することに成功した。本研究で我々が得た知見は、ヒトを含む他の哺乳類の精子形成を体外で誘導する系を開発するうえでも有用であることを期待している。現在学術誌への投稿を準備している。

This study で は, マ ウ ス に お い て establish さ れ た fine 巣 の organ culture に よ る in vitro spermatogenesis is を ヒ ト へ 応 with す る こ と を purpose と し た. し か し now の マ ウ を ス training department with い た ヒ ト tissue の culture で は between 1-2 weeks ほ ど で highly に line d し て し ま い, そ の の after training 継 続 が difficult し か っ た. Add え て, now ま で マ ウ ス outside の mammals で は で differentiation in vitro, さ せ た germ cell か ら nextgen individual を make し た example は report さ れ て い な い. そ こ で I 々 は, マ ウ ス の み に suitable す る fine 巣 training department を he の mammals に も 応 with す る べ く, ラ ッ ト を like と seaborne し て be 験 を line っ て き た. Before the annual ま で に I 々 は culture method や culture の beg を 検 Qiao り return し や, cultivate の acid concentration ホ ル モ ン class の add な ど が ラ ッ ト の in vitro spermatogenesis is open 発 に お い て, undifferentiated な ラ ッ ト male reproductive cells を half body で あ る has drifted back towards &yen; form sperm cells ま で differentiation さ せ る こ と に successful し た. This year は, cultivate の さ ら な る optimization の た め に, half body ま で differentiation し た germ cell に な first structure of 徴 に GFP が set product す る ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク ラ ッ ト を import し て be 験 を line っ た. Youdaoplaceholder0, during the culture, the <s:1> culture medium に contains まれるメタボラ まれるメタボラ ト the changes over time <s:1> デ タを タを タを take the <s:1> culture medium タを to improve を and test みた. メ タ ボ ロ ミ ク ス parsing の usefulness は い ま だ は っ き り と shows す こ と は で き て い な い も の の, others 々 な に elongation at the end of the trial error の sperm others の cells ま で と の differentiation, differentiation inducing し た has drifted back towards &yen; form sperm cells を with い た 顕 micro fertilization に よ り ラ ッ ト litter を make す る こ と に successful し た. This study で I 々 が た know see は, ヒ ト を containing む he の mammals の spermatogenesis を induced in vitro で す る started を 発 す る う え で も useful で あ る こ と を expect し て い る. Now submit to Academic Journal へ へ を を prepare for <s:1> て て る る.

项目成果

組織培養法を用いたin vitroラット精子形成系の開発

利用组织培养法开发大鼠体外精子发生系统

• 发表时间: 2021
• 作者: Matsumura Takafumi;Sato Takuya;Abe Takeru;Sanjo Hiroyuki;Katagiri Kumiko;Kimura Hiroshi;Fujii Teruo;Tanaka Hiromitsu;Hirabayashi Masumi;Ogawa Takehiko;松村貴史
• 通讯作者: 松村貴史

精巣組織培養法を用いたin vitroラット精子形成系の開発

利用睾丸组织培养法开发体外大鼠精子发生系统

• 发表时间: 2020
• 作者: 松村貴史;片桐久美子;三條博之;安部丈;古目谷暢;佐藤卓也;田中宏光;平林真澄;小川毅彦
• 通讯作者: 小川毅彦