上皮細胞の炎症様応答によるがん変異細胞の排除制御

通过上皮细胞的炎症反应控制癌症突变细胞的消除

• 批准号: 19J10318
• 负责人: 佐藤 奈波
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyoto University (2020)Hokkaido University (2019)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J10318/
• 关键词: 細胞競合; 炎症応答; 膜電位; COX-2

前年度に明らかにした炎症応答が変異細胞の排除を抑制するという結果に基づき、マウスモデルの解析を行なった。具体的には当研究室で樹立した細胞競合モデルマウスに膵炎を誘導し、炎症と変異細胞の排除の関係性をvivoにおいても明らかにした。さらに、これまで同定した正常細胞と変異細胞の相互作用の結果起こる炎症応答の上流を理解するために、細胞自律的・細胞非自律的な変化の解析を行った。様々な候補の中で、MDCK細胞の膜電位に着目し解析を行なった。具体的な内容を以下に示す。(1) 膜電位の変化を可視化できる染色方法の確立：これまで報告がなされている試薬の中で、違ったメカニズムによって膜電位を可視化できる、1. Rho6G, 2. DiBAC(4)3, 3. FluoVoltを用いた。膜を脱分極させるカリウムイオンが高濃度に含まれているバッファーを用い、膜が脱分極した際にこれらの試薬が膜電位を反映し蛍光を失う/発するのかを検証した。結果、全ての試薬において膜電位を反映することがわかった。(2) 膜電位の変化の解析：正常細胞とRasV12変異細胞の膜電位を測定した。正常細胞と比較するとRasV12変異細胞ではより膜が脱分極していることを明らかにした。さらに、混合培養下では正常細胞に囲まれたRasV12変異細胞の膜の脱分極が抑えられている様子も明らかにした。上記の細胞自律的/細胞非自律的な膜電位の変化に加えて、細胞膜上のFluoVolt試薬が非常に激しく動いている様子も観察された。この結果から細胞の辺上で膜電位の変化がoscillationしている可能性が考えられる。今後、共同研究によって波が存在するかどうかの可否、または正常細胞-変異細胞間で何らかのやりとりがあるのかどうかを明らかにする。

In the past year, the inflammatory response has been eliminated, and the results have been analyzed. Specific research on the relationship between inflammation induction, inflammation and rejection of heterogenous cells The interaction between normal cells and heterogeneous cells results in the understanding of inflammatory responses, the analysis of cellular self-regulation and non-self-regulation. The membrane potential of MDCK cells was analyzed in the middle of the test. Specific contents are shown below. (1)Establishment of staining method for visualization of membrane potential change: report of membrane potential change, test of membrane potential change and visualization of membrane potential change. Rho6G, 2. DiBAC(4)3, 3. FluoVolt is used. The membrane depolarization test results in a high concentration of light, and the membrane depolarization test results in a low concentration of light. The result is that the membrane potential of the whole sample is reflected. (2)Analysis of membrane potential changes: normal cells and RasV12 abnormal cells membrane potential measurement. Compared with normal cells, Ras V 12 cells are different from normal cells. In addition, under mixed culture, the membrane of normal cells was separated from RasV12 cells, and the membrane of normal cells was separated from RasV12 cells. Note that the cell autonomous/cell autonomous membrane potential changes, the FluoVolt test on the cell membrane is very exciting The possibility of oscillation of membrane potential on the cell surface is examined. In the future, we will jointly study whether there is any difference between normal cells and different cells.

项目成果

上皮細胞層の炎症様応答によるがん変異細胞の排除制御

通过上皮细胞层的炎症反应控制癌症突变细胞的消除

• 发表时间: 2020
• 作者: Sato Nanami;Yako Yuta;Maruyama Takeshi;Ishikawa Susumu;Kuromiya Keisuke;Tokuoka Suzumi M.;Kita Yoshihiro;Fujita Yasuyuki;佐藤奈波
• 通讯作者: 佐藤奈波

The COX-2/PGE2 pathway suppresses apical elimination of RasV12-transformed cells from epithelia

• DOI: 10.1038/s42003-020-0847-y
• 发表时间: 2020-03-18
• 期刊: COMMUNICATIONS BIOLOGY
• 影响因子: 5.9
• 作者: Sato, Nanami;Yako, Yuta;Fujita, Yasuyuki
• 通讯作者: Fujita, Yasuyuki