In vitro derivation of germ cells from common marmoset pluripotent stem cells

从普通狨猴多能干细胞中体外衍生生殖细胞

基本信息

批准号：
19J12871
负责人：
吉松祥
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J12871/
关键词：
マーモセット生殖細胞 ES細胞 iPS細胞遺伝子改変

项目摘要

本年度は、これまでの研究成果に関しての論文投稿及び、実験系の確立を行なった。まず、マーモセットES細胞における高効率遺伝子改変による生殖細胞特異的レポーターの導入に関しての論文発表を行なった(Yoshimatsu and Sone et al., PLOS One 2019; Yoshimatsu et al., Stem Cell Res 2020)ほか、マーモセットからのTransgene非依存性iPS細胞の作出に関しても論文投稿を行なった(Nakajima and Yoshimatsu et al., BBRC 2019; Yoshimatsu et al., submitted)。以上のように作製した生殖細胞特異的レポーター導入ES/iPS細胞を用いて、始原生殖細胞(PGC)において特異的に発現する転写因子を薬剤誘導性に強制発現させることによって、分化10日目にFACSによってレポーター及びマーカー陽性細胞を分取することに成功した。これらの細胞はヒトやマウスで報告されているPGC特異的な遺伝子発現パターンを示すことから、本課題における第１の目標（PGC誘導系の構築）は達成された(Yoshimatsu et al., submitted)。今後は、分化誘導した細胞のMethylome解析を行うほか、本研究で得られたマーモセットPGC様細胞のTranscriptomeデータから他種(ヒト、マカクザル、マウス)PGCとの種差に関しての考察を行う予定である。さらに、最終的な機能的配偶子の誘導に向けた条件検討を引き続き進めていく。具体的には、PGC様細胞からの精子幹細胞(SSC)の誘導、および卵巣構造の再構築に向けた実験系の確立を目指す。

今年，我们就以前的研究结果提交了论文，并建立了实验系统。 First, a paper was published on the introduction of germ cell-specific reporters by highly efficient genetic modification in marmoset ES cells (Yoshimatsu and Sone et al., PLOS One 2019; Yoshimatsu et al., Stem Cell Res 2020), and also submitted a paper on the production of Transgene-independent iPS cells from marmosets (Nakajima and Yoshimatsu et al., BBRC 2019; Yoshimatsu等人，提交）。使用如上所述产生的生殖细胞特异性报告基因诱导的ES/IPS细胞，在原始生殖细胞中特异性表达的转录因子（PGC）是药物诱导的，可诱导在原始生殖细胞（PGCS）中特异性表达的转录因子的强力表达（PGC），记者和标记阳性细胞成功地通过面部分类为10th Andies niffience nide Andivies niffies niffies。这些细胞表现出在人类和小鼠中报道的PGC特异性基因表达模式，并且实现了该任务的第一个目标（构建PGC诱导系统）（Yoshimatsu等人，提交）。将来，我们将对分化诱导的细胞进行甲基化分析，并考虑PGC和其他物种（人类，猕猴，小鼠）之间的物种差异，从这项研究中获得的果ma骨PGC样细胞的转录组数据中。此外，我们将继续研究最终诱导配子的条件。具体而言，我们旨在建立一个实验系统，旨在从PGC样细胞和卵巢结构重建中诱导精子干细胞（SSC）。

项目成果

期刊论文数量（9）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Deriving transgene-free iPSCs from fibroblasts of multiple mammalian species via a neural stem cell-like state

通过神经干细胞样状态从多种哺乳动物的成纤维细胞中衍生出非转基因 iPSC

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yoshimatsu Sho;Okano Hideyuki
通讯作者：
Okano Hideyuki

Researchmap

研究地图

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

誘導多能性幹細胞の製造方法及びキット

诱导多能干细胞的制备方法及试剂盒

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

A versatile toolbox for knock-in gene targeting based on the Multisite Gateway technology

DOI：
10.1371/journal.pone.0221164
发表时间：
2019-08
期刊：
PLoS ONE
影响因子：
3.7
作者：
Sho Yoshimatsu;T. Sone;Mayutaka Nakajima;Tsukika Sato;Ryotaro Okochi;Mitsuru Ishikawa;Mari Nakamura;E. Sasaki;Seiji Shiozawa;H. Okano
通讯作者：
Sho Yoshimatsu;T. Sone;Mayutaka Nakajima;Tsukika Sato;Ryotaro Okochi;Mitsuru Ishikawa;Mari Nakamura;E. Sasaki;Seiji Shiozawa;H. Okano

In vitro disease modeling of the FTDP-17 TAU R406W mutation using patient-derived iPSCs

使用患者来源的 iPSC 建立 FTDP-17 TAU R406W 突变的体外疾病模型

DOI：
发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
0
作者：
M. NAKAMURA;H. WATANABE;S. SHIOZAWA;S. MAEDA;S.-I. HISANAGA3;N. SAHARA;T. KIMURA;T. MIYASAKA;A. TAKASHIMA;T. IKEUCHI;H. OKANO
通讯作者：
H. OKANO