微細藻類の酵素ディスプレイ技術を用いた細胞内ディーゼル生産

利用微藻酶展示技术生产细胞内柴油

• 批准号: 19J13762
• 负责人: 野々山 智美
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J13762/
• 关键词: バイオ燃料; オイルボディ; オイルボディエンジニアリング; 珪藻

本研究の大目的は、珪藻オイルボディ上への酵素ディスプレイ技術を開発することで、バイオディーゼル燃料生産時に従来必要なメチルエステル化反応を細胞内で完結させることである。それに向けて、本年度はオイルボディ上へ酵素をディスプレイするために必須の基盤技術の確立を目的とした研究を行った。具体的には、オイルボディ上の足場タンパク質であるDOAP1とGFP等の任意のタンパク質との融合タンパク質の安定的な発現が課題となっており、その解決に向けて(1) 発現誘導可能なプロモーター使用時の培養条件検討、(2) オイルボディ分画条件の検討、および(3) 新規足場タンパク質の探索を行った。その結果、(1) 硝酸レダクターゼのプロモーターを用いた発現誘導時に必要な硝酸ナトリウムの濃度や添加のタイミングを決定することができた。この成果をオイル高蓄積珪藻に応用することで、オイルボディ局在タンパクを含めた難発現性の膜タンパク質の安定的な発現が期待できる。また、(2)細胞破砕条件を詳細に検討することで、オイルボディのサイズに関わらずオイルボディを単離する技術を確立した。この成果は、オイルボディおよびオイルボディ局在タンパク質をin vitroで試験する際に、培養条件非依存的なオイルボディ画分の調製を可能とするものであり、今後のオイルボディエンジニアリングに関する研究を推進する上で重要な技術である。さらに、(2)の成果を応用し、(3) 酵素ディスプレイのための足場タンパク質として、DOAP1以外の新規候補タンパク質を同定した。これらの成果や、付随して得られたオイルボディの動的挙動に関する知見は、学会誌や国内外の学会での発表で認められている。

In this study, the main purpose of this study is to increase the activity of enzymes in the whole body of the body. In this study, it is necessary to increase the concentration of enzymes in the cells during fuel production. In recent years, it is necessary to make sure that the purpose of the study is to improve the level of enzyme production in the current year. The specific equipment, etc. (1) the training conditions for the use of the equipment, (2) the conditions for the separation of New rules and regulations (3) the new rules and regulations should be explored and explored. The results are as follows: (1) it is necessary to increase the concentration of nitric acid in order to determine the effect of nitric acid on the use of nitric acid. In terms of the results, the results show that there is a high level of stability, which is expected to be stable. Please, (2) the condition of cell breakage should not be affected. Please do not know if the technology is properly established. In terms of the results, the results, the information, the results, the information, the results, the The results of DOAP1, (2), (2), (3), enzyme, enzyme and enzyme. Thank you for the results, pay for the information on the activities you have taken, and learn to learn about the performance of the societies at home and abroad.

项目成果

Proteomics analysis of lipid droplets indicates involvement of membrane trafficking proteins in lipid droplet breakdown in the oleaginous diatom Fistulifera solaris

• DOI: 10.1016/j.algal.2019.101660
• 发表时间: 2019-12-01
• 期刊: ALGAL RESEARCH-BIOMASS BIOFUELS AND BIOPRODUCTS
• 影响因子: 5.1
• 作者: Nonoyama, Tomomi;Nojima, Daisuke;Tanaka, Tsuyoshi
• 通讯作者: Tanaka, Tsuyoshi

オイル高蓄積珪藻Fistulifera solaris JPCC DA0580株におけるリポファジーの解析

聚油硅藻 Fistulifera Solaris JPCC 菌株 DA0580 的自噬分析

• 发表时间: 2019
• 作者: 野々山 智美;野島 大佑;野田 将礼;前田 義昌;吉野 知子;松本 光史;Bowler Chris;田中 剛
• 通讯作者: 田中 剛

Lipid droplet degradation mechanism in oleaginous diatom Fistulifera solaris JPCC DA0580 suggested by lipid droplet proteome

脂滴蛋白质组提示油质硅藻 Fistulifera sunaris JPCC DA0580 中脂滴降解机制

• 发表时间: 2019
• 作者: Nonoyama Tomomi;Nojima Daisuke;Noda Masayoshi;Maeda Yoshiaki;Yoshino Tomoko;Matsumoto Mitsufumi;Bowler Chris;Tanaka Tsuyoshi
• 通讯作者: Tanaka Tsuyoshi

IBENS(フランス)

伊本斯（法国）

Analysis of lipid droplet dynamics in oleaginous diatom Fistulifera solaris

含油硅藻Fistulifera Solaris中脂滴动力学分析

• 发表时间: 2019
• 作者: Nonoyama Tomomi;Nojima Daisuke;Noda Masayoshi;Maeda Yoshiaki;Yoshino Tomoko;Matsumoto Mitsufumi;Bowler Chris;Tanaka Tsuyoshi
• 通讯作者: Tanaka Tsuyoshi