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カイコ核多角体病ウイルスラオス株の高タンパク質発現メカニズムの解明とベクター開発

家蚕核多角体病毒Lao株高蛋白表达机制的阐明及载体开发

基本信息

批准号：
19J13817
负责人：
藤本正太
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

カイコ核多角体病ウイルスラオス株（BmNPV La）は、ラオスで単離された新規BmNPV株であり、標準株であるBmNPV T3と比較してポリヘドリンタンパク質の生産能が高いなどの特徴を持つ。本研究では、Laについて以下の2つの研究を行った。①Laの全ゲノム配列の解明LaはT3と比較して特徴的な表現型を示す一方、その全ゲノム配列は明らかではなかった。そこで本研究では始めに、RNA-seqとサンガーシークエンスによりLaの全ゲノム配列127618 bp（GenBank accession number LC500465.1）を明らかにした。配列を解析した結果、LaはT3と高い相同性（99.29%）を示す一方、多くの遺伝子の配列に違いがあることが明らかとなった。また、RNA-seqのデータを利用してT3との比較トランスクリプトーム解析を行い、La感染細胞の宿主、及びウイルストランスクリプトームの特徴を明らかにした。上記の結果は論文としてVirus Genes誌に発表した（PMID: 31912283）。②Laを利用した高発現型バキュロウイルス発現系（BEVS）の構築LaはBEVSに一般的に使用される株であるT3と比較して、多くのポリヘドリンタンパク質を生産する。そのため本研究ではLaのBEVSへの応用を試みた。LaとT3で2種のレポーター遺伝子（Luc、LacZ）を発現させ、その発現量を比較した結果、LaはLucについてはT3よりも有意に多くの組換えタンパク質を発現したものの、LacZでは同程度の発現量であった。また本研究では、Laを用いて簡便に組換えウイルスを構築できるように、Laの線状化ゲノムウイルス（La_L）を構築し、更にLa_LからBmNPVがコードするプロテアーゼ遺伝子であるv-cathを欠損した。加えて、Laの遺伝子解析用にLa Bacmidを構築した。

BmNPV T3 is a new strain of BmNPV and a standard strain of BmNPV. This study is conducted in the following 2 ways: The expression pattern of La T3 and La T3 was compared with that of La T3. This study was initiated by RNA-seq, which was assigned to 127618 bp (GenBank accession number LC500465.1). The results of the analysis show that the similarity of La and T3 is high (99.29%), and the difference between La and T3 is high (99.29%). The characteristics of RNA-seq expression, RNA-seq expression, RNA The results of the above report are reported in the journal Virus Genes (PMID: 31912283). (2) Construction of La BEVS by using La BEVS as a high-level development system. This study was conducted on the basis of the results of the study. La Luc and LacZ are the two main components of the T3 gene, and the two components of the T3 gene are the same. In this study, La was used to construct the linear structure of La, and La was used to construct BmNPV. La Bacmid is used for analysis of La Bacmid.

项目成果

期刊论文数量（3）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Bombyx mori nucleopolyhedrovirus gp37遺伝子の解析

家蚕核多角体病毒gp37基因分析

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
Liu Chia-Ming; Phukhahad Supannee; Auamcharoen Wanida; Matsuyama;Shigeru; Kainoh;Yooichi;藤本正太・疋田弘之・國生龍平・鈴木智大・勝間進・岩永将司
通讯作者：
藤本正太・疋田弘之・國生龍平・鈴木智大・勝間進・岩永将司

タイ由来カイコ核多角体病ウイルス未解析株 BmNPV Ta の解析

泰国未定性家蚕核多角体病毒株BmNPV Ta的分析