核小体に局在するNPM-ALKの機能および局在制御機構の解明

阐明位于核仁的 NPM-ALK 的功能和定位控制机制

• 批准号: 19J14508
• 负责人: 内原 脩貴
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J14508/
• 关键词: NPM-ALK; 核小体; Ebna1bp2 (EBP2); p53; Akt; mTORC1

未分化大細胞リンパ腫の原因遺伝子産物である融合型チロシンキナーゼNPM-ALKは、細胞質だけでなく核小体にも局在するが、核小体に局在するNPM-ALKの機能は不明である。これまでに私は、NPM-ALKがキナーゼ活性に依存して、核小体に局在することを見出した。さらに、核小体におけるNPM-ALKの結合分子として、リボソームRNA生合成に関与する分子であるEbna1bp2 (EBP2) を同定した。本研究では、NPM-ALKによる形質転換におけるEBP2の役割を解析し、核小体に局在するNPM-ALKの機能を明らかにすることを目指した。抗pY抗体を用いたIP-IBにより、NPM-ALKがEBP2のチロシン残基をリン酸化することが示唆された。RNA干渉法によるEBP2のノックダウンは、NPM-ALK発現細胞の細胞周期をG0/G1期で停止させ、増殖を抑制した。さらに、EBP2のノックダウンにより、p53の活性化が誘導されることを見出した。EBP2のp53活性制御機構を明らかにするために、まず、EBP2がNPM-ALKによるシグナル伝達に及ぼす影響を検討した。NPM-ALK発現細胞において、EBP2のノックダウンによりAktのリン酸化が亢進することを見出し、Aktが過剰に活性化していることが示唆された。Akt阻害剤GDC-0068およびAktの下流分子であるmTORC1の阻害剤Rapamycinを用いた解析により、EBP2のノックダウンによるp53の活性化は、AktやmTORC1を介していることが明らかとなった。したがって、核小体に局在するNPM-ALKは、EBP2と相互作用することで、Akt-mTORC1経路の過剰な活性化を抑制し、p53の活性を負に制御することが示唆された。以上の成果は、これまで不明であった核小体NPM-ALKの機能の理解を大幅に進めるものであると考えられる。

Undifferentiated large cell differentiation is caused by gene products such as fusion, nucleosome, and nucleosomes. The function of NPM-ALK is unknown. NPM-ALK is the most important part of the DNA sequence. NPM-ALK binding molecules are identified in the nucleosomes and in the RNA synthesis. This study aims to clarify the role of NPM-ALK in the characterization of EBP2 and the role of nucleosome in NPM-ALK. Anti-pY antibodies are used to detect IP-IB, NPM-ALK and EBP2 residues. RNA stem cells express EBP2 protein, NPM-ALK protein, G0/G1 cell cycle arrest and proliferation inhibition. The activation of p53 in EBP2 was also observed. EBP2 p53 activity control mechanism is discussed in detail. NPM-ALK gene expression in cells, EBP2 gene expression in cells, Akt gene expression in cells, Akt gene expression in cells. Akt inhibitor GDC-0068 is a downstream molecule of Akt inhibitor Rapamycin, which is used in the analysis of Akt inhibitor GDC-0068 and Akt inhibitor GDC-0068. NPM-ALK and EBP2 interactions in nucleosomes inhibit the activation of Akt-mTORC1 pathway and negatively inhibit the activity of p53. The above achievements have greatly improved the understanding of the function of nucleosome NPM-ALK.

项目成果

Methotrexate significantly induces apoptosis by inhibiting STAT3 activation in NPM-ALK-positive ALCL cells

甲氨蝶呤通过抑制 NPM-ALK 阳性 ALCL 细胞中 STAT3 的激活显着诱导细胞凋亡

• DOI: 10.1016/j.bcp.2019.113666
• 发表时间: 2019
• 期刊: Biochemical Pharmacology
• 影响因子: 5.8
• 作者: Uchihara Yuki;Komori Reiko;Tago Kenji;Tamura Hiroomi;Funakoshi-Tago Megumi
• 通讯作者: Funakoshi-Tago Megumi

核小体に局在するNPM-ALKの機能解析

定位于核仁的 NPM-ALK 的功能分析

• 发表时间: 2019
• 作者: 内原 脩貴;多胡 めぐみ;多胡 憲治;田村 悦臣
• 通讯作者: 田村 悦臣

核小体におけるEBP2を介したNPM-ALKの新規形質転換メカニズムの解析

核仁中EBP2介导的NPM-ALK新转化机制分析

• 发表时间: 2019
• 作者: 内原 脩貴;多胡 めぐみ;多胡 憲治;田村 悦臣
• 通讯作者: 田村 悦臣

The mechanisms of taxodione-induced apoptosis in BCR-ABL-positive leukemia cells

紫杉二酮诱导BCR-ABL阳性白血病细胞凋亡的机制

• DOI: 10.1254/fpj.153.147
• 发表时间: 2019
• 期刊: Folia Pharmacologica Japonica
• 作者: Uchihara Yuki;Tago Kenji;Funakoshi-Tago Megumi
• 通讯作者: Funakoshi-Tago Megumi

NPM-ALK発現細胞におけるEBP2を介した形質転換の分子機構の解析

EBP2介导的NPM-ALK表达细胞转化的分子机制分析

• 发表时间: 2019
• 作者: 内原 脩貴;多胡 めぐみ;多胡 憲治;田村 悦臣
• 通讯作者: 田村 悦臣