生細胞イメージング解析によるアストロサイトの神経保護機構の解明

通过活细胞成像分析阐明星形胶质细胞的神经保护机制

基本信息

  • 批准号:
    19J15030
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2019
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2019-04-25 至 2021-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究ではアストロサイトに発現するバソプレシン(AVP)受容体に着目し、神経損傷におけるAVP受容体の神経保護機構の分子機構の解析に取り組み、本年度は以下の成果を挙げた。まず、ニューロンとアストロサイトの共培養系を作製し、塩化アンモニウム投与による、アンモニア毒性試験を行ったところ、塩化アンモニウム投与濃度依存的にニューロンの脱落が観察された。続いて、AVP受容体の機能を検討するため、ニューロンとアストロサイトの共培養系へAVPと塩化アンモニウムを投与した。予備実験の結果では、AVPのみを投与した場合の神経細胞の突起形態は、何も添加しない場合と同程度あるいは、若干の伸長傾向が見られたことに対し、AVPと塩化アンモニウムを共投与した際には、ニューロンの脱落が引き起こされた。このことから、アンモニア毒性におけるAVP受容体を介した神経保護機構への作用効果は低いことが示唆された。塩化アンモニウムおよびAVPによるニューロンおよびアストロサイトの生理機能への影響をより詳細に解析するために、ライブセルイメージングにより、細胞内シグナル分子応答の観察を試みた。蛍光タンパク質型Ca2+可視化センサーを、ニューロンおよびアストロサイトへ発現させた。遺伝子導入試薬を用いて、細胞内へCa2+可視化センサーをニューロンおよびアストロサイトに発現させ、グルタミン酸を投与したところ、ニューロンの細胞内Ca2+濃度上昇が惹起されたことから、遺伝子導入法によるCa2+イメージングの実用性を確認した。AVPおよびアンモニア毒性による細胞内シグナル伝達経路への影響をより詳細に解析するために、今後は、Ca2+に加えて、cAMP、ATPなどの分子センサーを導入してイメージング解析を行う予定である。
This study で は ア ス ト ロ サ イ ト に 発 now す る バ ソ プ レ シ ン (AVP) by the capacity of body に し, god 経 damage に お け る AVP protected by god let body の 経 mechanism の molecular の parsing に み り group, this year's は の results under を 挙 げ た. ま ず, ニ ュ ー ロ ン と ア ス ト ロ サ イ ト の し the co-culture system を cropping, salt ア ン モ ニ ウ ム cast with に よ る, ア ン モ ニ ア toxicity test line を っ た と こ ろ, salt ア ン モ ニ ウ ム cast and concentration dependent に ニ ュ ー ロ ン の off が 観 examine さ れ た. 続 い て, AVP should the body function of の を beg す 検 る た め, ニ ュ ー ロ ン と ア ス ト ロ サ イ ト の co-culture system へ AVP と salt chemical ア ン モ ニ ウ ム を cast with し た. Reserve be 験 の results で は, AVP の み を cast with し た occasions の god 経 は の processes form, any も add し な と い occasions with degree あ る い は, several の elongation tendency が see ら れ た こ と に し seaborne, AVP と salt chemical ア ン モ ニ ウ ム を and pitched し た interstate に は, ニ ュ ー ロ ン の off が lead き up こ さ れ た. こ の こ と か ら, ア ン モ ニ ア toxicity に お け る AVP を interface by let body し た god 経 protection agency へ の role working low fruit は い こ と が in stopping さ れ た. Salt chemical ア ン モ ニ ウ ム お よ び AVP に よ る ニ ュ ー ロ ン お よ び ア ス ト ロ サ イ ト の physiology へ の influence を よ り detailed analytical す に る た め に, ラ イ ブ セ ル イ メ ー ジ ン グ に よ り, intracellular シ グ ナ ル molecular 応 answer の 観 examine を try み た. 蛍 light タ ン パ ク mass type Ca2 + visual セ ン サ ー を, ニ ュ ー ロ ン お よ び ア ス ト ロ サ イ ト へ 発 now さ せ た. Heritage 伝 son try importing 薬 を with い て, intracellular へ Ca2 + visual セ ン サ ー を ニ ュ ー ロ ン お よ び ア ス ト ロ サ イ ト に 発 now さ せ, グ ル タ ミ ン acid を cast with し た と こ ろ, ニ ュ ー ロ ン の intracellular Ca2 + concentration rising が provoked さ れ た こ と か ら, but 伝 import method に よ る Ca2 + イ メ ー ジ ン グ の be reconfirm by sexual を し た . AVP お よ び ア ン モ ニ ア toxicity に よ る intracellular シ グ ナ ル 伝 da 経 road へ の influence を よ り detailed analytical す に る た め に, future は, Ca2 + に え て, cAMP, ATP な ど の molecular セ ン サ ー を import し て イ メ ー ジ ン グ parsing line を う designated で あ る.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Mechanism of L-glutamine-induced glucagon-like peptide-1 secretion from enteroendocrine L cells via amino acide receptors.
L-谷氨酰胺诱导肠内分泌L细胞通过氨基酸受体分泌胰高血糖素样肽-1的机制。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Harada K;Nakamura T;Kamiya T;Takizawa M;Nakajima K;Kitaguchi T;Kato T;Tsuboi T.
  • 通讯作者:
    Tsuboi T.
Glutamine-induced signaling pathways via amino acid receptors in enteroendocrine L cell lines
  • DOI:
    10.1530/jme-19-0260
  • 发表时间:
    2020-04-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    3.5
  • 作者:
    Nakamura, Takumi;Harada, Kazuki;Tsuboi, Takashi
  • 通讯作者:
    Tsuboi, Takashi
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相似海外基金

時差ぼけ症状におけるバソプレシン受容体を介した臓器間ネットワークの役割
加压素受体介导的器官间网络在时差症状中的作用
  • 批准号:
    20J15408
  • 财政年份:
    2020
  • 资助金额:
    $ 1.34万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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