The multifaceted function and quality clarification of saturated polysaccharides contributing to the activation of intestinal immunity

有助于肠道免疫激活的饱和多糖的多方面功能和品质澄清

基本信息

  • 批准号：
    19J20015
  • 负责人：
    BAK Juneha
  • 金额：
    $ 1.98万
  • 依托单位：
    Kyushu University
  • 依托单位国家：
    日本
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份：
    2019
  • 资助国家：
    日本
  • 起止时间：
    2019-04-25 至 2022-03-31
  • 项目状态：
    已结题

项目摘要

目的　これまで、フコイダンを始めとする海藻由来の硫酸化多糖類が生理機能を発揮するために、分子内の硫酸基が重要な役割を果たすことが報告されてきた。しかし、多糖類の硫酸基含量を測定する従来の分析法は、脱硫酸化が生じる可能性のある厳しい処理条件での抽出と精製過程を伴うため定量値の再現性が非常に低いことが問題の一つとなっている。この課題の解決に向けて、過去２年間の研究では、硫酸化オリゴ糖およびフコイダン標品を測定対象に、イミダゾールをリガンドとして用いたligand-assisted 1H NMR法を構築してきた。これに引き続いて本年度は、当該NMR定量法を天然海藻に含まれる多糖類の硫酸基含量の測定に適用するための至適条件を検討した。また、蛍光標識フコイダンを用いて、マウス腸管免疫細胞におけるフコイダンの作用標的細胞を同定するとともに、フコイダン受容体および免疫賦活作用の解明に関する実証試験を行った。結果　Ligand-assisted 1H NMR法の海藻由来硫酸化多糖類の硫酸基定量への適用：先の研究で確立したligand-assisted 1H NMR法では、海藻多糖を構成するウロン酸のカルボキシル基がリガンドとの相互作用に干渉するため、海藻熱水抽出物にCaCl2を加え、アルギン酸を沈殿除去した。さらに、1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimideとNaBH4を用いて、残存する全てのカルボキシル基をヒドロキシメチル基に変換した。この化学的還元反応では脱硫酸化が生じないことを確認した上で、ligand-assisted 1H NMR法を用いて硫酸基含量を測定した。その結果、従来法の結果と同等かつ再現性の高い定量値が得られた。以上の結果から、本研究で新たに構築した定量法は、天然多糖類の硫酸基含量の測定に適用可能であることを示した
Purpose こ れ ま で, フ コ イ ダ ン を beginning め と す る seaweed origin の sulfate polysaccharide が physiology を 発 swing す る た め に, intramolecular の sulfuric acid base が important な "を cut fruit た す こ と が report さ れ て き た. し か し, polysaccharide の を amount of sulfuric acid base す る 従 to は の analysis, desulfurization acidification が じ る possibility の あ る 厳 し い 処 bedding conditions で の spare と refining process を with う た め quantitative numerical の reproducibility が very low に い こ と が problem の つ と な っ て い る. の solve に こ の subject to け て, over the past 2 years の で は, sulfating オ リ ゴ sugar お よ び フ コ イ ダ ン standard product を determination like に seaborne, イ ミ ダ ゾ ー ル を リ ガ ン ド と し て in い た を ligand - assisted 1 h NMR method to construct し て き た. こ れ に lead き 続 い て を は this year, when the NMR quantitative method contains natural seaweed に ま れ る polysaccharide の の amount of sulfuric acid base に applicable す る た め の to optimum conditions を 検 please し た. ま た 蛍 light logo フ コ イ ダ ン を with い て, マ ウ ス insufflate immune cells に お け る フ コ イ ダ ン を の function target cells with fixed す る と と も に, フ コ イ ダ ン by let body お よ び immune activating role の interpret に masato す る be certificate test line を っ た. Result Ligand-assisted 1H NMR assay for quantitative analysis of sulfated polysaccharides from seaweeds by sulfate groups へ へ applicable: で の research first established し た ligand - assisted 1 h NMR method で は を seaweed polysaccharides, constitute す る ウ ロ ン acid の カ ル ボ キ シ ル base が リ ガ ン ド と の interaction に dry involved す る た め, seaweed extract hot water に CaCl2 を え, ア ル ギ ン acid を Shen Dian remove し た. さ ら に, 1 - baton rouge - 3 - (3 - dimethylaminopropyl) carbodiimide と NaBH4 を with い て, residual す る full て の カ ル ボ キ シ ル base を ヒ ド ロ キ シ メ チ ル base に variations in し た. こ の chemical also yuan against 応 で は desulfurization acidification が raw じ な い こ と を confirm し た on で, 1 h NMR method を ligand - assisted with い て を amount of sulfuric acid base し た. The そ <s:1> results and the 従 method <s:1> results are と of the same が reproducibility <s:1> high <s:1> quantitative values が obtain られた. の above results か ら, this study で new た に build し た は quantitative method, natural polysaccharide の の amount of sulfuric acid base に may apply で あ る こ と を shown し た

项目成果

期刊论文数量（10）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Ligand-aided quantitative and selective NMR assay for sulfated saccharides in solution
溶液中硫酸化糖的配体辅助定量和选择性 NMR 测定
  • DOI：
  • 发表时间：
    2019
  • 期刊：
  • 影响因子：
    0
  • 作者：
    Juneha Bak;Yoshiyuki Miyazaki;Toshiro Matsui
  • 通讯作者：
    Toshiro Matsui
Profiling sulfate content of polysaccharides in seaweed species using a ligand-assisted <sup>1</sup>H-NMR assay
使用配体辅助<sup>1</sup>H-NMR 分析海藻中多糖的硫酸盐含量
  • DOI：
    10.3136/fstr.27.505
  • 发表时间：
    2021
  • 期刊：
    Food Science and Technology Research
  • 影响因子：
    0.6
  • 作者：
    Bak Juneha;Miyazaki Yoshiyuki;Nakano Hayato;Matsui Toshiro
  • 通讯作者：
    Matsui Toshiro
Regulatory mechanism of fucoidan-mix AG in intestinal mucosal immune cells
岩藻依聚糖-mix AG对肠粘膜免疫细胞的调节机制
  • DOI：
  • 发表时间：
    2021
  • 期刊：
  • 影响因子：
    0
  • 作者：
    Yoshiyuki Miyazaki;Juneha Bak;Hayato Nakano;Shugo Takeuchi;Hideaki Takeuchi;Daisuke Tachikawa
  • 通讯作者：
    Daisuke Tachikawa
An establishment of NMR-based analytical assay for sulfated saccharides in solution
基于核磁共振的溶液中硫酸化糖分析方法的建立
  • DOI：
  • 发表时间：
    2019
  • 期刊：
  • 影响因子：
    0
  • 作者：
    Juneha Bak;Yoshiyuki Miyazaki;Toshiro Matsui
  • 通讯作者：
    Toshiro Matsui
The cooperative induction of macrophage activation by fucoidan derived from Cladosiphon okamuranus and β-glucan derived from Saccharomyces cerevisiae
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