Identification of a new treatment target of EGFR inhibitors in canine squamous cell carcinoma

犬鳞状细胞癌EGFR抑制剂新治疗靶点的鉴定

• 批准号: 19J15532
• 负责人: 宮本 良
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nippon Veterinary and Life Science University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J15532/
• 关键词: 扁平上皮癌; 犬; アファチニブ; EGFR阻害剤

犬の頭頸部扁平上皮癌 (HNSCC) は従来の治療法では制御が困難であり、新たな治療戦略の確立が必要である。これまでの申請者の研究で、 アファチニブは特定の犬のHNSCC株化細胞の増殖をin vitroおよびin vivoで強く増殖を抑制することが明らかになった。しかしアファチニブは従来の既知標的分子を抑制しなかったことから、特定の犬HNSCC細胞では新規の標的分子を抑制する可能性が考えられた。そこで当該年度では、まず犬のHNSCC細胞におけるアファチニブの新規標的分子を特定する為、前年度で実施したリン酸化蛋白質の網羅的解析の結果を基にリン酸化が抑制された分子24種類を候補分子とした。次いで、これらの分子の塩基配列を解析すると共にsiRNAを作製した。 塩基配列解析では、いずれの遺伝子においてもドライバーとなる遺伝子変異は認められなかった。一方、分子XをsiRNAによりノックダウンするとアファチニブ感受性細胞の生存率が明らかに減少した。このことから、犬のHNSCC細胞において分子Xはアファチニブの新規標的分子として期待できると考えた。さらに、犬のHNSCC症例を対象としたアファチニブの臨床試験では、アファチニブは特定の犬HNSCCに対して著しい抗腫瘍効果を示した。これらのことから、特定の犬HNSCC細胞では分子Xが生存および増殖に重要な役割を果たしており、アファチニブはこの分子を抑制することで増殖を抑制している可能性がある。本研究ではその分子機構までの解析には至らなかったが、臨床試験の結果を含めて考えると犬HNSCCに対するアファチニブを用いた治療法は新規治療戦略となる可能性が考えられる。

狗的鳞状细胞癌（HNSCC）在狗中很难通过常规治疗方法控制，并且需要新的治疗策略。先前的申请人研究表明，Afatinib在某些狗体外和体内强烈抑制HNSCC细胞的增殖。但是，阿法替尼没有抑制常规的已知靶标分子，并且认为它可以抑制某些犬HNSCC细胞中的新型靶分子。因此，在这个财政年度，为了首先确定狗HNSCC细胞中Afatinib的新靶标分子，根据对上一年进行的磷酸化蛋白的全面分析的结果，使用了24个具有抑制磷酸化的候选分子。接下来，分析了这些分子的碱基序列并制备siRNA。在核苷酸序列分析中，在任何一个基因中都没有观察到驱动因素的基因突变。另一方面，用siRNA击倒分子X清楚地降低了Afatinib敏感细胞的存活率。这表明可以将分子X视为狗HNSCC细胞中Afatinib的新靶分子。此外，在Afatinib在狗HNSCC病例中的临床试验中，Afatinib对某些犬HNSCC的抗肿瘤作用显着。从这些发现中，分子X在某些犬HNSCC细胞中的生存和增殖中起着重要作用，而Afatinib可以通过抑制该分子来抑制增殖。尽管这项研究没有对分子机制进行分析，考虑到临床试验的结果，但Afatinib治疗犬HNSCC的治疗可能是一种新颖的治疗策略。

项目成果

Canine histiocytic sarcoma cell lines with SHP2 p.Glu76Gln or p.Glu76Ala mutations are sensitive to allosteric SHP2 inhibitor SHP099.

具有 SHP2 p.Glu76Gln 或 p.Glu76Ala 突变的犬组织细胞肉瘤细胞系对变构 SHP2 抑制剂 SHP099 敏感。

• DOI: 10.1111/vco.12524
• 发表时间: 2019
• 期刊: Veterinary and Comparative Oncology
• 影响因子: 2.1
• 作者: Tani H;Kurita S;Miyamoto R;Ochiai K;Tamura K;Bonkobara M.
• 通讯作者: Bonkobara M.