Ovol2遺伝子群を介したマウス生殖細胞系列分岐メカニズムの解明

阐明Ovol2基因组介导的小鼠种系分支机制

• 批准号: 19J20553
• 负责人: 内藤 優希
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J20553/
• 关键词: 始原生殖細胞; 細胞系譜の分岐; シグナル

始原生殖細胞 (Primordial Germ Cells ; PGCs)形成過程において、BMPおよびWNTシグナルは必要不可欠である。これまでの研究において、これら 2つのシグナルの下流で機能する可能性のあるOvol遺伝子群に着目し、これらの遺伝子群はPGCsへの分岐を促進する因子であり、Ovol2が主にこの分岐に機能することを解明した。前年度では、OVOL2のゲノム上のターゲット領域を高感度に検出することのできるクロマチン免疫沈降シーケンス (ChIP-seq)をおこなうため、ES細胞での条件検討をおこなった。この検討をふまえ、今年度は体外誘導系をもちいて、始原生殖細胞に分化する段階の細胞においてChIP-seqをおこなった。興味深いことに、OVOL2が直接結合するターゲット領域の中に、始原生殖細胞形成に必須の転写因子であるBlimp1の既知のエンハンサー領域が含まれていた。OVOL2がこのエンハンサー領域に結合して転写を制御しているかを検証するため、ルシフェラーゼアッセイをおこなったところ、Ovol2遺伝子のうち転写活性ドメインを有するOvol2bが存在するときにのみ転写上昇が認められた。また、ChIP-seqの結果、上皮間葉転換を促進する転写因子が多数含まれていた。がんなどでは報告されているOvol2遺伝子のうち転写抑制ドメインをもつOvol2aによる上皮間葉転換の抑制が、生殖細胞への分化においても機能していることが示唆された。ルシフェラーゼアッセイをおこなったところ、Ovol2a存在下でのみ有意な転写抑制が観察された。上皮間葉転換を促進する転写因子をノックアウトしたところ、始原生殖細胞形成において、多能性関連因子の発現上昇がみられた。これらのことから、Ovol2aが始原生殖細胞形成において、上皮間葉転換を抑制することで、多能性の再獲得に寄与することが示された。

The formation process of Primordial Germ Cells (PGCs) にお にお て, BMPおよびWNTシグナ て て is necessary and not lacking である. こ れ ま で の research に お い て, こ れ ら 2 つ の シ グ ナ ル の function of obscene で す る possibility の あ る Ovol heritage 伝 subgroup に mesh し, こ れ ら の heritage 伝 subgroup は PGCs へ の branching を promote す る factor で あ り, Ovol2 が main に こ の branching に function す る こ と を interpret し た. Before the annual で は, OVOL2 の ゲ ノ ム on の タ ー ゲ ッ ト field を Gao Gan degrees に 検 out す る こ と の で き る ク ロ マ チ ン immune sink シ ー ケ ン ス (ChIP - seq) を お こ な う た め, ES cells で 検 の conditions for を お こ な っ た. Beg を こ の 検 ふ ま え, inducing our は "を も ち い て, beginning the reproductive cells に す る Duan Jie の cells に お い て ChIP - seq を お こ な っ た. Takes deep い こ と に, OVOL2 が directly combined す る タ ー ゲ ッ ト field の に, beginning primordial germ cells forming に must の planning write factor で あ る Blimp1 の already know の エ ン ハ ン サ が ー field containing ま れ て い た. OVOL2 が こ の エ ン ハ ン サ ー fields に し て planning write を suppression し て い る か を 検 card す る た め, ル シ フ ェ ラ ー ゼ ア ッ セ イ を お こ な っ た と こ ろ, OVOL2 but 伝 の う ち planning write activity ド メ イ ン を have す る Ovol2b が exist す る と き に の み planning write up が recognize め ら れ た. Youdaoplaceholder0, ChIP-seq <s:1> results, epithelial-mesenchymal 転 exchange を promoting する転 writing factor が mostly contain まれて まれて た た. が ん な ど で は report さ れ て い る Ovol2 posthumous son 伝 の う ち planning write inhibit ド メ イ ン を も つ Ovol2a に よ る epithelial mesenchymal planning in の が, germ cell へ の differentiation に お い て も function し て い る こ と が in stopping さ れ た. ル シ フ ェ ラ ー ゼ ア ッ セ イ を お こ な っ た と こ ろ, presence of Ovol2a で の み intentionally な planning write inhibit が 観 examine さ れ た. Epithelial mesenchymal planning in を promote す る planning write factor を ノ ッ ク ア ウ ト し た と こ ろ beginning, primordial germ cells form に お い て, pluripotent masato even factor の 発 now rising が み ら れ た. こ れ ら の こ と か ら, Ovol2a が beginning of primordial germ cells form に お い て, leaf planning between epithelial change を suppression す る こ と で, pluripotent の get に send す る こ と が shown さ れ た.

项目成果

始原生殖細胞の分岐と マウスOvol 遺伝子

原始生殖细胞和小鼠 Ovol 基因的分歧

• 发表时间: 2021
• 作者: Naitou Yuki;Nagamatsu Go;Hamazaki Nobuhiko;Shirane Kenjiro;Hayashi Masafumi;Hayashi Makoto;Kobayashi Satoru;Hayashi Katsuhiko;内藤 優希
• 通讯作者: 内藤 優希

he functional requirement of mouse Ovol genes in lineage segregation of germ cells

小鼠 Ovol 基因在生殖细胞谱系分离中的功能要求

• 发表时间: 2020
• 作者: Naitou Yuki;Nagamatsu Go;Hamazaki Nobuhiko;Shirane Kenjiro;Hayashi Masafumi;Hayashi Makoto;Kobayashi Satoru;Hayashi Katsuhiko;内藤 優希;内藤 優希;内藤 優希
• 通讯作者: 内藤 優希

The functional requirement of mouse Ovol genes in lineage segregation of germ cells

小鼠Ovol基因在生殖细胞谱系分离中的功能要求

• 发表时间: 2020
• 作者: Naitou Yuki;Nagamatsu Go;Hamazaki Nobuhiko;Shirane Kenjiro;Hayashi Masafumi;Hayashi Makoto;Kobayashi Satoru;Hayashi Katsuhiko;内藤 優希;内藤 優希
• 通讯作者: 内藤 優希

Functional requirement of Ovol genes for lineage specification of mouse PGCs

Ovol 基因对小鼠 PGC 谱系规范的功能要求

• 发表时间: 2019
• 作者: Naitou Yuki;Nagamatsu Go;Hamazaki Nobuhiko;Shirane Kenjiro;Hayashi Masafumi;Hayashi Makoto;Kobayashi Satoru;Hayashi Katsuhiko;内藤 優希;内藤 優希;内藤 優希;内藤 優希
• 通讯作者: 内藤 優希