RNAテクノロジーを基盤としたヒト造血幹細胞選別技術の開発
基于RNA技术的人类造血干细胞选择技术的发展
基本信息
- 批准号:19J21199
- 负责人:
- 金额:$ 1.6万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2019
- 资助国家:日本
- 起止时间:2019-04-25 至 2022-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究では、試験管内で合成した人工RNAを用いて細胞内のマーカー分子を検出する「RNAスイッチ」技術を用いて、新たな造血幹細胞選別手法の開発を試みた。マイクロRNA (miRNA) は、遺伝子の転写後発現制御を担う短いnon-coding RNAである。miRNAは細胞種ごとに特徴的な発現パターンを示すため、細胞種のマーカーとなることが明らかになってきた。そこで本研究ではmiRNAに着目し、miRNAの活性を可視化・定量可能なRNAスイッチを用いた造血幹細胞の細分化を試みた。これまでの研究から、生体外で増幅したマウス骨髄由来造血幹細胞の中には、miRNAによってレポーターの発現が強く抑制されるmiRNA活性の高い細胞と、レポーターの発現が抑制されないmiRNA活性のない (低い) 細胞が混在していることが分かっていた。本年度は、miRNA活性の高い細胞と低い細胞の性質を評価するために、放射線照射したマウスへの移植アッセイを実施した。放射線照射等により造血機能を破壊した宿主マウスに解析対象のドナー細胞を移植し、ドナー細胞由来の血球細胞が末梢血中に産生されているかどうかを移植後数ヶ月にわたって解析することにより、ドナー細胞が多分化能と自己複製能を備えた造血幹細胞であったかどうかを判定できる。セルソーターを用いてmiRNA活性の高い細胞と低い細胞を分取し、それぞれ宿主マウスへ移植したところ、miRNA活性の高い細胞を移植したマウスにおける末梢血キメリズム (末梢血中のドナー由来血球細胞の割合) は、活性が低い細胞を移植したマウスに比べて高かった。この結果から、多分化能と自己複製能を備えた造血幹細胞は、miRNA活性の低い細胞に比べ、miRNA活性の高い細胞内により豊富に含まれていたことが示唆された。
In this study, artificial RNA was synthesized in vitro and in vivo. The "RNAi" technology was used to detect RNAi, and the newer hematopoietic cells were selected to use different methods to start the test. Please RNA (miRNA), please make sure that the non-coding RNA is short after you write. The characteristics of miRNA cell models show that they can be used to determine whether they are safe or not. In this study, miRNA was targeted and miRNA activity was quantified. it is possible to use hematopoietic progenitor cells to differentiate into RNA cells. In vitro and in vitro, the hematopoietic cells were isolated from hematopoietic cells, and miRNA was strongly inhibited in the cells with high miRNA activity and low miRNA activity. the cells were mixed in the cells. This year, miRNA activity is high, cell activity is high, cell density is low, and radiation exposure is critical. Radiation and other haematopoietic machines can disrupt host cell transplantation, stem cell transplantation, and peripheral blood cell transplantation. the number of months after transplantation can be analyzed, and the multidifferentiation of hematopoietic cells can be replicated by itself. The grafts were separated with high miRNA activity, low cell activity, host cell transplantation, high miRNA activity cell transplantation, peripheral blood cell cleavage, active low cell transplantation, and active cell transplantation. The results showed that the ability of multidifferentiation to replicate the hematopoietic cells, the ratio of low miRNA activity to low hematopoietic cells, the high activity of miRNA to intracellular DNA, and the ability to replicate the hematopoietic progenitor cells.
项目成果
期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
An Expanded Library of Translational Regulators for Synthetic Gene Circuits in Mammalian Cells
哺乳动物细胞合成基因电路翻译调节因子的扩展库
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Hiroki Ono;Shunsuke Kawasaki;Moe Hirosawa;Hirohide Saito
- 通讯作者:Hirohide Saito
Orthogonal Protein-Responsive mRNA Switches for Mammalian Synthetic Biology
- DOI:10.1021/acssynbio.9b00343
- 发表时间:2020-01-01
- 期刊:
- 影响因子:4.7
- 作者:Ono, Hiroki;Kawasaki, Shunsuke;Saito, Hirohide
- 通讯作者:Saito, Hirohide
Programmable and scalable mammalian biocomputing platform with RNA-protein interaction
具有 RNA-蛋白质相互作用的可编程和可扩展的哺乳动物生物计算平台
- DOI:
- 发表时间:2018
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Shunsuke Kawasaki;Hiroki Ono;Hirohide Saito
- 通讯作者:Hirohide Saito
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