骨髄異形成症候群における共通の分子基盤の解明

阐明骨髓增生异常综合征的共同分子基础

• 批准号: 19J21723
• 负责人: 藪下 知宏
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J21723/
• 关键词: 骨髄異形成症候群; 急性骨髄性白血病; エピゲノム; DNA脱メチル化薬; HDAC阻害剤; 有糸分裂

近年、遺伝子解析技術の開発により、MDSの発症・進展に関わる種々の遺伝子変異が同定され、その多様性が明らかになった。一方で、MDSは無効造血・血球減少・各造血細胞の異形成などの共通する臨床像を呈するにも関わらず、分子機構の観点からはMDSの共通点について十分に明らかにされていない。そこで本研究の目的はMDSの病態を決定づける共通の分子基盤、特に共通の遺伝子発現変化を同定することである。CRISPR libraryを用いた網羅的解析により、MDS進展に重要な分子基盤の同定にも取り組んだ。MDS進展に重要な分子基盤の同定にも取り組んだ。当研究室で樹立されたMDS/AML細胞株にSuntagシステム（CRISPR/Cas9を応用し内在性遺伝子発現の強い活性化を可能にしたシステム）を導入したSuntag-MDS/AML細胞を作成し、全ゲノムを対象とする機獲得型CRISPRスクリーニングをおこなったところ、治療抵抗性・感受性を規定するパスウェイの遺伝子群を同定できた。さらに、エピゲノム薬として知られているHDAC阻害剤およびDNA脱メチル化薬およびの感受性・抵抗性を付与するパスウェイを同定するために、同様のスクリーニングを行った。HDAC阻害剤の抵抗性因子としては、Myc・Myb・Trib1 などの複数の転写因子が抽出された一方で、DNA脱メチル化薬の抵抗性を規定するパスウェイとして有糸分裂制御機構、特に有糸分裂後期における染色体分配に関わる複数の遺伝子（Cdk1, Cdc20, Cdca8, Dsn1）が抽出された。実際に、二次性白血病を中心としたヒト白血病細胞において、臨床的に使用される低濃度で広範なDNA異数性および多数性が誘導されることを明らかにした。この結果から、DNA脱メチル化薬は忠実な染色体分配の撹乱を作用機序の一つとして有していることが示唆された。

In recent years, the development of gene analysis technology, MDS development, progress, related to the diversity of gene diversity, diversity, and diversity. One side, MDS has no hematopoiesis, hematopoiesis, different formation of each hematopoietic cell, common clinical image, molecular mechanism, common point of MDS, very clear The purpose of this study is to determine the common molecular basis for MDS pathologies, and to identify the common molecular basis for MDS pathologies CRISPR library is used to analyze and identify important molecular bases for MDS development. MDS progress is important for the determination of molecular basis components. When the laboratory established the MDS/AML cell line Suntag system (CRISPR/Cas9 gene expression and intrinsic gene expression and strong activation possibility) to introduce Suntag-MDS/AML cells to create, fully target, machine-acquired CRISPR gene expression system, treatment resistance and susceptibility regulation, and determine its gene subset. In addition, the HDAC resistance agent and DNA degradation agent were identified in the same way as the resistance agent. The resistance factors of HDAC inhibitors include: Myc·Myb·Trib1; multiple genes (Cdk1, Cdc20, Cdca8, Dsn1); mitotic control mechanisms; and the regulation of resistance to DNA fragmentation. The central and clinical use of low concentrations of DNA heterozygosity and majority induction in leukemia cells As a result, DNA fragmentation has been shown to disrupt the mechanism of chromosome allocation.

项目成果

Genome-wide CRISPR Activation Screen Revealed That Mitotic Fidelity Confers Resistance to DNA-hypomethylating Agents for Myeloid Malignancies.

全基因组 CRISPR 激活筛选显示，有丝分裂保真度赋予骨髓恶性肿瘤对 DNA 低甲基化药物的抵抗力。

• 发表时间: 2021
• 作者: Shun-ichi ETO;Kazuma HIGASHISAKA;Aoi KOSHIDA;Kenta SATO;Mao OGURA;Hirofumi TSUJINO;Kazuya NAGANO;Yasuo TSUTSUMI;西村幸浩;西村幸浩;西村幸浩;李 優大;Ri Yudai;李 優大;李 優大;Yudai RI;Kei MORIWAKI;森脇 慧;森脇慧;Kei MORIWAKI;Kei MORIWAKI;Kei MORIWAKI;森脇 慧;森脇慧;森脇慧;Tomohiro Yabushita;藪下知宏;Tomohiro Yabushita
• 通讯作者: Tomohiro Yabushita

Mitotic fidelity confers resistance to DNA-hypomethylating agents in myeloid malignancies.

有丝分裂保真度赋予骨髓恶性肿瘤对 DNA 低甲基化剂的抵抗力。

• 发表时间: 2021
• 作者: Shun-ichi ETO;Kazuma HIGASHISAKA;Aoi KOSHIDA;Kenta SATO;Mao OGURA;Hirofumi TSUJINO;Kazuya NAGANO;Yasuo TSUTSUMI;西村幸浩;西村幸浩;西村幸浩;李 優大;Ri Yudai;李 優大;李 優大;Yudai RI;Kei MORIWAKI;森脇 慧;森脇慧;Kei MORIWAKI;Kei MORIWAKI;Kei MORIWAKI;森脇 慧;森脇慧;森脇慧;Tomohiro Yabushita;藪下知宏
• 通讯作者: 藪下知宏

Genome-wide CRISPR activation screen identifies multiple clinically actionable resistance mechanisms with DNA-hypomethylating agents in myeloid malignancies.

全基因组 CRISPR 激活筛选通过 DNA 低甲基化药物在骨髓恶性肿瘤中识别出多种临床可行的耐药机制。

• 发表时间: 2021
• 作者: Shun-ichi ETO;Kazuma HIGASHISAKA;Aoi KOSHIDA;Kenta SATO;Mao OGURA;Hirofumi TSUJINO;Kazuya NAGANO;Yasuo TSUTSUMI;西村幸浩;西村幸浩;西村幸浩;李 優大;Ri Yudai;李 優大;李 優大;Yudai RI;Kei MORIWAKI;森脇 慧;森脇慧;Kei MORIWAKI;Kei MORIWAKI;Kei MORIWAKI;森脇 慧;森脇慧;森脇慧;Tomohiro Yabushita
• 通讯作者: Tomohiro Yabushita