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Analysis of signal transduction mechanism for methanol-dependent gene expression in methylotrophic yeast

甲基营养酵母甲醇依赖性基因表达信号转导机制分析

基本信息

批准号：
19J21821
负责人：
井上紘一
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J21821/
关键词：
転写因子メタノール資化性酵母リン酸化修飾解析シグナル伝達濃度応答性メタノール濃度遺伝子発現制御メタノール濃度リン酸化修飾ペキソファジー転写因子Mxr1 アミノ酸置換ドメイン探索アナログなシグナル伝達質量分析免疫沈降

项目摘要

本年度の研究では、メタノール資化性酵母K. phaffiiにおいて細胞外界のメタノール濃度に依存した転写活性化因子Mxr1のリン酸化修飾制御に着目し、Mxr1のリン酸化レベルと下流の遺伝子発現（AOX1）との関係についてより詳細に解析した。Mxr1の推定リン酸化部位変異体発現株を用いてAOX1のmRNA量を定量した結果、AOX1の濃度応答性メタノール誘導（CRMI）に重要なリン酸化部位を同定した。また、Mxr1の上流に位置するプロテインキナーゼPkc1の活性化によって、Mxr1のリン酸化レベルも変化することを見出した。これらの結果から、細胞表層で感知されたメタノール濃度情報はPkc1を介して転写因子Mxr1へと伝達され、下流の遺伝子発現を制御するというCRMI経路の分子機構を明らかにした。本研究成果はMolecular Microbiology誌に掲載され、International Union of Microbiological Societies 2022など、国内外の学会で発表した。この他に、K. phaffiiにおける培地中メタノール濃度とペキソファジーの関係についてまとめ、International Congress on Yeasts 15thや第7回酵母研究若手の会で発表した。またメタノール資化性酵母C. boidiniiにおいて、メタノール濃度に応じて発現誘導される転写活性化因子Mpp1に着目した。メタノール培養時にMPP1遺伝子の発現制御が適切な量・タイミングで行われないと、CRMIに依存した遺伝子発現やメタノール培地での生育に負の影響を及ぼすことがわかった。さらにMPP1遺伝子の発現制御に重要なプロモーター領域を同定し、MPP1遺伝子の発現調節のメカニズムを明らかにしつつある。本研究成果の一部は日本農芸化学会2022年大会で学会発表した。

This year, we have studied the microcosmic activity of yeast K. phaffii. The extracellular temperature is dependent on the activation factor Mxr1. The acidizing process is based on the acidification system, and the Mxr1 is acidified in the presence of (AOX1). Mxr1 presumed that the acidified site of the plant was determined by the quantitative results of AOX1 mRNA measurement, and that the important acidified site of the acidified site was the same as that of the CRMI. The location on the upstream of the Mxr1, the Pkc1, the activation, the acidification, the acidification, the outflow, the activation, the activation, the acidification, the outflow. The results of the experiment, the cell table, the awareness of the information, the Pkc1, the writing factor, the Mxr1, the control, the information, the information. The results of this research are: Molecular Microbiology, International Union of Microbiological Societies 2022, and domestic and foreign academic societies. In the study of yeast in the seventh cycle of International Congress on Yeasts 15th, the results of the study of the seventh round of yeast in the earth, such as the study of yeast, K. phaffii, K. The information system is based on the information of yeast C. boidinii, the temperature of the yeast is different, and the activation factor Mpp1 is focused on. During the training period, you need to make sure that you need to cut the amount of money you need to make sure that you don't know how to do it, and that you can use it to make sure that you don't know how to do it, and that you can use it to make sure that you don't know how to give birth to your child, and that you can use MPP1 to make sure that you don't know how to do it. Do you want to know that you are in the same position as you are in the field of MPP1? you need to know that your domain is the same, and that you are in the same area, and that MPP1 is not. The result of this research is a table of the 2022 General meeting of the Agricultural Society of Japan.

项目成果

期刊论文数量（13）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Candida boidiniiにおけるメタノール誘導性転写因子Mpp1の生理機能解析

博伊丁假丝酵母甲醇诱导转录因子Mpp1的生理功能分析

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
井上紘一;岩瀬公佑;由里本博也;阪井康能
通讯作者：
阪井康能

Regulation of a transcription factor Mxr1 involved in methanol-dependent gene expression in Komagataella phaffii

参与 Komagataella phaffii 甲醇依赖性基因表达的转录因子 Mxr1 的调节

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
○井上紘一;由里本博也;阪井康能
通讯作者：
阪井康能

メタノール資化性酵母 Komagataella phaffii におけるメタノール存在下でのペキソファジー抑制機構の解析

甲醇同化酵母Komagataella phaffii中甲醇存在下的自噬抑制机制分析

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
中山智仁;平野篤;Kentaro Sakaniwa; Hiromi Tanji; Shuting Zhang; Zhenyi Hu; Hang Yin; Umeharu Ohto; Toshiyuki Shimizu;井上紘一
通讯作者：
井上紘一

Komagataella phaffii 転写活性化因子Mxr1 のメタノール濃度依存性遺伝子発現制御における機能領域の解析

Komagataella phaffii转录激活子Mxr1在甲醇浓度依赖性基因表达调控中的功能区分析