权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

生体内のHIV-1複製を制御するエピジェネティックネットワークの解明

阐明控制体内 HIV-1 复制的表观遗传网络

基本信息

批准号：
19J22802
负责人：
長岡峻平
金额：
$ 1.98万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、ゲノム中にGFP遺伝子を組み込んだHIV1-GFPをヒト化マウスに感染させることで、GFP陽性のCD4T細胞（ウイルス産生細胞）とGFP陰性のCD4T細胞（非感染細胞と潜伏感染細胞）をそれぞれ分取した。これらの細胞集団のトランスクリプトームをdigital RNA-sequencing analysisにより解析し、この情報を利用してGFP陽性CD4T細胞で特異的に機能する転写因子を推定した。その結果、GFP陽性CD4T細胞ではKMT2AというヒストンのH3K4me修飾酵素の活性が高い可能性が示唆された。そこで、KMT2AがHIV-1の複製を正に制御しているという仮説を立て、培養細胞を用いた検証を行った。初代培養CD4T細胞を用いたKMT2A阻害剤添加実験ではHIV-1の複製を抑制する傾向が観察されたが、KMT2AノックアウトT細胞株では同様な傾向を確認することができなかった。その理由としては、KMT2AがHIV-1の産生を規定する因子ではなく、HIV-1産生細胞のマーカーであった可能性が考えられる。先行研究において、KMT2AはNF-κBと相互作用し、下流の遺伝子群の転写を調節することが知られている（Wang et al., J Cell Sci., 2012）。HIV-1の感染に際し、NF-κB下流の遺伝子群の転写が促進されたことで、HIV-1産生細胞においてKMT2Aの活性が高いと推定された可能性がある。今後の課題は、HIV-1産生細胞（GFP陽性CD4T細胞）において活性が高いと推定された他の因子を解析することで、HIV-1の産生を規定する因子を探ることである。

In this study, GFP gene expression was divided into HIV-1-GFP positive and GFP negative CD4 T cells (non-infected cells and latently infected cells). This information was analyzed by digital RNA-sequencing analysis and used to estimate the specific function of GFP positive CD4 T cells. The results showed that GFP-positive CD4 T cells had a high probability of H3K4me modifying enzyme activity in KMT2A. KMT2A and HIV-1 replication are controlled in vitro and in vitro. CD4 T cells in primary culture were observed to have a tendency to inhibit HIV-1 replication when KMT2A inhibitors were added, and KMT2A T cell lines were identified to have a tendency to inhibit HIV-1 replication. The reasons for this are that KMT2A regulates HIV-1 production, and the possibility of HIV-1 producing cells is examined. In previous studies, KMT2A was found to interact with NF-κB and regulate the expression of downstream genes (Wang et al., J Cell Sci., 2012）。HIV-1 infection, NF-κB down-stream gene expression is promoted, HIV-1 producing cells in the KMT2A activity is high, putative possibility is high. Future research will focus on the analysis of high activity and putative factors in HIV-1 producing cells (GFP-positive CD4 T cells) and the exploration of factors that regulate HIV-1 production.