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ブタ飼育環境におけるプロファージを中心とした薬剤耐性菌出現機構の解明

阐明生猪养殖环境中以噬菌体为中心的耐药菌出现机制

基本信息

批准号：
19J23516
负责人：
那須川忠弥
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Azabu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

膜小胞は、細菌が死滅および分裂する際に、細菌のDNAやタンパク質等を内包しながら形成されることが知られている。それゆえ抗菌薬を使用すると、細菌が死滅し、細菌の遺伝子を含んだ膜小胞が多く放出されることが考えられる。特に抗菌薬が多く使用される畜産現場では、細菌の薬剤耐性遺伝子を内包する膜小胞が多く産生されると予測される。この膜小胞がほかの細菌へと薬剤耐性遺伝子を水平伝播伝播し、薬剤耐性菌が出現すると予想される。また、プロファージとは、宿主細菌のゲノムに取り込まれたファージゲノムである。一部の抗菌薬により、子ファージの産生が誘導される。子ファージは、複製時にはしばしば誤って薬剤耐遺伝子等宿主のDNAの一部を内包し、他の細菌へ伝播する。そのため、プロファージも畜産現場における薬剤耐性菌出現に関係していると考えられる。以上のように、抗菌薬により大量に産生された膜小胞やファージが薬剤耐性遺伝子を運搬し、薬剤耐性遺伝子を水平伝播する可能性が考えられている。これらの機構を理解することは、薬剤耐性化を防ぐ上で重要である。本研究では、豚レンサ球菌を畜産現場における薬剤耐性菌のモデルとし、膜小胞やプロファージによる薬剤耐性遺伝子伝播に関して解析を進めた。これまで、ブタから臨床分離された37株の膜小胞形成量を定量し、膜小胞高産生株2株を取得した。以降、この2株に着目し、研究を推進した。「膜小胞の産生を促進する抗菌薬の特定」を行った。本研究では、豚レンサ球菌に対し臨床現場で使用頻度の高い抗菌薬を使用し、膜小胞・プロファージの産生を亢進する抗菌薬の探索を行った。さらに、膜小胞が内包する遺伝子をメタゲノム解析を使用して解析した。養上清中に放出される頻度に関して解析を行った。一方、培養上清からのプロファージ分離・定量法を確立できておらず、プロファージが内包する薬剤耐性遺伝子の解析は行えなかった。

When the membrane cell is destroyed and divided, the DNA and protein of the bacteria are encapsulated and formed. Antibacterial agents are used to kill bacteria, and bacteria are released from membrane cells. In particular, the use of antimicrobial agents in livestock sites, bacterial resistance genes, membrane cell production and prediction The membrane cells of these bacteria are expected to propagate horizontally and to develop resistant strains. The main reason for this is that they are not allowed to use the Internet. A part of the antibacterial agent, seed production and induction. When a gene is cloned, it is necessary to include a part of the DNA of a host such as a resistant gene and a part of the DNA of other bacteria. The relationship between the occurrence of resistant bacteria in livestock production and the development of animal husbandry The possibility that the above mentioned antimicrobial agents are produced in large quantities and that the resistant agents are transported and horizontally transmitted is examined. It is important to understand the structure of the organization and to develop tolerance. In this study, we analyzed the relationship between the transmission of resistant bacteria and membrane cells in the field of animal husbandry. 37 strains were isolated from clinical isolates, and 2 strains were obtained with high membrane vesicle formation. Since then, these two companies have focused on advancing research. "Promotion of membrane cell production and identification of antimicrobial agents" This study aims to explore the use of antimicrobial agents with high frequency of use in clinical settings, and to explore the role of antimicrobial agents in the production of membrane cells. In addition, the genetic proteins contained in membrane cells must be analyzed using a computer. The frequency of emission in the upper part of the system is analyzed. A method for the determination of the presence of a protein in culture supernatant by quantitative analysis

项目成果

期刊论文数量（18）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

New dot-blot method for evaluating the effect of inactivators on mite and Japanese cedar pollen allergens

用于评估灭活剂对螨虫和日本柳杉花粉过敏原影响的新斑点印迹方法

DOI：
10.1093/bbb/zbab146
发表时间：
2021
期刊：
Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry
影响因子：
0
作者：
Yoshida Megumi;Mizukami Keijiro;Kurata Keigo;Nasukawa Tadahiro;Uchiyama Jumpei;Sakaguchi Masahiro
通讯作者：
Sakaguchi Masahiro

グラム陽性細菌のメンブレンヴェシクルの分離方法の検討

革兰氏阳性菌膜囊泡分离方法的研究

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
杉本良輔;那須川忠弥;内山淳平;島倉秀勝;福田憲;松崎茂展;阪口雅弘
通讯作者：
阪口雅弘

Purification of membrane vesicles from Gram-positive bacteria using flow cytometry, after iodixanol density-gradient ultracentrifugation

碘克沙醇密度梯度超速离心后，使用流式细胞术纯化革兰氏阳性菌的膜囊泡

DOI：
10.1016/j.resmic.2020.11.003
发表时间：
2021
期刊：
Res. Microbiol
影响因子：
0
作者：
Nasukawa T;Sugimoto R;Uchiyama J;Uchiyama I;Murakami H;Fukuda K;Matsuzaki S;Sakaguchi M
通讯作者：
Sakaguchi M

妊婦のGBSスクリーニングテストの検査精度を向上する試薬の開発

开发试剂提高孕妇GBS筛查检测的准确性