バクテリオファージの産業利用を目指したファージバンクの構築

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細菌感染症治療の現場で多剤耐性化して世界的に問題になっている細菌として、黄色ブドウ球菌、クレブシエラ属菌、アシネトバクター属菌、緑膿菌などがある。これらの多剤耐性菌を殺菌できるファージの収集・特性解析およびバンク化は多剤耐性菌感染症治療に向けて非常に重要である。今年度は前年度に引き続き、それらの多剤耐性菌に感染できるファージの探索を行なった。系統的に多様で薬剤耐性株が含まれる菌株を使いながら、薬剤耐性株を殺菌できるファージを中心に探索を進めた。ファージ探索には岐阜市とその周辺地域から採取した流入下水を用いた。上記の株を宿主としてファージ探索を行なった結果、新たに60種類以上のファージを得ることができた。下水サンプルと標的宿主菌の前培養の際、従来はガラス試験管で行なっていたが、マイクロタイタープレートに変更することで、一度に扱うことができるサンプル数が多くなり、昨年度より多くのファージを得られるようになった。さらに、寒天プレート上でファージを検出する際に使用するソフトアガロースの濃度を下げることで、より多種類、かつこれまでと異なる特徴を保持するファージを収集できるようになった。ファージ探索と並行して、これまで収集したファージの特徴づけを行なった。多数の臨床分離株を用いて殺菌活性測定をハイスループットに行い、ファージ感染の有無と感染の程度を明らかにした。感染の宿主域が広いファージについては全ゲノム解析を行った。次年度も引き続き薬剤耐性菌に感染できるファージの収集に注力したいと考えている。