マスト細胞の脱顆粒応答は分泌刺激の種類で変化するか？―イメージングによる解析―

肥大细胞的脱颗粒反应是否会根据分泌刺激的类型而变化？

• 批准号: 19K07272
• 负责人: 東尾 浩典
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K07272/
• 关键词: 細胞生物学; マスト細胞; 脱顆粒; エキソサイトーシス; 分泌様式; 分泌刺激

マスト細胞は分泌顆粒に様々な生理活性物質を貯留しており、分泌刺激を受けてそれらを開口放出（脱顆粒）する。本研究では（4Dあるいは3Dでの）ライブイメージングにより、マスト細胞の脱顆粒様式の実態解明を試みている。ライブイメージングには独自に構築した、分泌顆粒の挙動（mCherry蛍光にて）と脱顆粒の有無（pH感受性GFPバリアントpHluorin蛍光にて）を同時に可視化することができる脱顆粒インジケーター、および細胞膜を近赤外光タンパク質iRFPで可視化する細胞膜マーカーを用いている。これまでに、1) 分泌顆粒は大きく動的なクラスターを形成し、クラスター間に一過的な接着やtubule構造の形成を介した連絡があること、2) TPA+A23187刺激時にはクラスター内／間での逐次的な脱顆粒（compound exocytosis）が顕著であること、3) 抗原刺激時にはクラスターが弛緩し個々の分泌顆粒が細胞辺縁へ移動し脱顆粒すること、および4) 脱顆粒インジケーターを含むマイクロベシクル様構造物が細胞膜から分泌刺激依存的に形成・放出されることを見出した。そのうち、4)は今後別の研究課題として解析することとした。今年度は、脱顆粒関連遺伝子の発現抑制や細胞骨格関連阻害剤を用いて、上記1), 2)および3)の分子基盤の探索を進めており、各ステップに働く分子や細胞骨格依存性に関する知見が得られつつある。

The cells secrete the physiologically active substances in the cells, and the physiological active substances are retained in the cells, and the secretion is stimulated to release (threshing) through the mouth of the cells. The purpose of this study is to analyze the characteristics of the cells, the cells, the grains, the cells, the cells, the cells, In the same time, we can change the temperature of the cell membrane by using the near-infrared light source, the cell membrane can be activated by near-red light, and the cell membrane can be activated by mCherry photosensitivity. at the same time, we can change the temperature of the cell membrane by using near-red light, the cell membrane can be scavenged by near-red light, and the cell membrane can be activated by near-red light. The cell membrane can be purified by near-red light, and the cell membrane can be activated by mCherry photoperiod. The main results are as follows: 1) the secretion of large amounts of particles, the formation of large particles, the formation of tubule devices, and then the formation of tubule devices. 2) during the stimulation of TPA+A23187, one step by one step-by-step exfoliation particles (compound exocytosis) are activated. 3) when the antigen was stimulated, the secretion of the two cells was relaxed, and the exudation of the two cells was activated. 4) the exfoliation of the cells was induced by the formation of cells that were dependent on the secretion of antigens. In the future, we will conduct further research and analysis of the project. This year, the results show that the inhibition of the cell bone cell is effective. (1), 2) the molecular basis is used to explore the progress, and the cell lattice dependence of each molecule is very important.

项目成果

3D image reconstruction techniques using STEM for arteriole and venule morphological analyses

使用 STEM 进行微动脉和微静脉形态分析的 3D 图像重建技术

• 发表时间: 2020
• 期刊: Annual Reports of Iwate Medical University Center for Liberal Arts and Sciences
• 作者: Hirakawa M.;Satoh YI.;Mchonde GJ.;Higashio H.;and Seino T.
• 通讯作者: and Seino T.

ライブイメージング技術に立脚した簡便なマスト細胞脱顆粒アッセイ系の構築

基于活体成像技术的简易肥大细胞脱颗粒检测系统的构建

• 发表时间: 2021
• 作者: 東尾浩典;横山拓矢;齋野朝幸
• 通讯作者: 齋野朝幸