生体内ゲノム編集を利用したHTLV-1を標的にする新規抗ウイルス療法

使用体内基因组编辑针对 HTLV-1 的新型抗病毒疗法

基本信息

批准号：
19K08870
负责人：
鈴木紳介
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒト T 細胞白血病ウイルス I 型 (Human T cell leukemia virus type I: HTLV-1) 由来の遺伝子を標的にし、体内ゲノム編集を利用した新規抗ウイルス療法の確立を目的とする。すべての HTLV-1 感染細胞で、3’側プロウイルスである、HTLV-1 bZIP factor (HBZ) 遺伝子は保存されいる。clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) /CRISPR-associated 9 (Cas9)システムは、感染細胞のゲノムに組込まれ、発現し続けるHBZ遺伝子を極めて効率的に機能失活させうるゲノム編集ツールである。HBZ を標的にし機能失活を目的とした、2つのCRISPR/Cas9 guideRNAsを作成した。HTLV-1感染T細胞株と低悪性度ATL患者白血病細胞を用いて、HBZを標的にしたCRISPR/Cas9 gRNAsを導入し、HBZ の欠失変異と変異効率を解析中である。HTLV-1感染T細胞株にNOTCH1蛋白が過剰発現しているが、阻害薬が増殖を抑制しないことを報告した。一方、HBZ mRNAは、蛋白質をコードするだけではなく、機能を有するbifunctional RNAであることも示されている。HBZを標的にしたCRISPR/Cas9 gRNAsを導入した、CMVプロモーター依存性アデノウイルスベクターも作成中である。感染細胞のゲノムに組込まれ、発現し続けるHBZ遺伝子をCRISPR/Cas9 ゲノム編集ツールを用いて、極めて効率的に機能失活させることが、発がんウイルスへの抗ウイルス療法の確立に重要と考えている。

目的是使用体内基因组编辑建立一种新型的抗病毒疗法，靶向源自人类T细胞白血病病毒I型（HTLV-1）的基因。在所有HTLV-1感染的细胞中，3'病毒，HTLV-1 BZIP因子（HBz）基因均得到保守。簇状的定期间隔短的短质体重复序列（CRISPR）/CRISPR相关的9（CAS9）系统是一种基因组编辑工具，可以使HBz基因灭活，而HBz基因被整合到受感染细胞的基因组中，并继续表达它们非常有效地表达它们。创建了两个CRISPR/CAS9 GUIDERNA，用于靶向HBZ和停用功能。使用HTLV-1感染的T细胞系和低度ATL患者的白血病细胞引入了靶向HBZ的CRISPR/CAS9 GRNA，正在分析HBZ缺失突变和突变效率。我们报道说，Notch1蛋白在HTLV-1感染的T细胞系中过表达，但抑制剂不会抑制增殖。另一方面，HBZ mRNA已被证明是一种功能性双功能RNA，不仅编码蛋白质。还创建了依赖CMV启动子依赖性腺病毒载体，并结合了针对HBz的CRISPR/CAS9 GRNA。我们认为，将整合到感染细胞基因组的HBZ基因的极有效失活，并继续使用CRISPR/CAS9基因组编辑工具表达，这对于建立癌症的抗病毒治疗很重要。

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Gamma-secretase inhibitor does not induce cytotoxicity in adult T-cell leukemia cell lines despite NOTCH1 expression.

DOI：
10.1186/s12885-022-10003-w
发表时间：
2022-10-15
期刊：
BMC cancer
影响因子：
3.8
作者：
通讯作者：

A survivin-responsive, conditionally replicating adenovirus induces potent cytocidal effects in adult T-cell leukemia/lymphoma

生存素反应性条件复制腺病毒在成人 T 细胞白血病/淋巴瘤中诱导有效的杀细胞作用

DOI：
10.1186/s12885-019-5730-1
发表时间：
2019
期刊：
BMC Cancer
影响因子：
3.8
作者：
Suzuki Shinsuke;Kofune Hiroki;Uozumi Kimiharu;Yoshimitsu Makoto;Arima Naomichi;Ishitsuka Kenji;Ueno Shin-ichi;Kosai Ken-ichiro
通讯作者：
Kosai Ken-ichiro