Development of novel screening technique for the rapid identification of poisoning cause for the emergency and critical care of the natural toxin poisoning cases

４年度目となる2022年度は、現在保有する毒草、毒キノコ、毒魚等の自然毒成分（塩基性（126種）・中性（119種）・酸性（15種）・１価及び２価カチオン（6種）・両性イオン（36種）系自然毒、計302種）中、前年度までに80点ほどを用いて検討した全血マイクロQuEChERS-LC-MS/MS分析による一斉分析について、最終的に水溶性成分の回収率不良が解決できなかったことから、液－液抽出をベースとするQuEChERS法ではなく、より化合物選択性が低くユニバーサル前処理法に適すると考えられる限外ろ過法を用いた迅速前処理法について、全化合物302種を用いて前処理法の検討を行った。市販限外ろ過カートリッジとしてPES膜型、Hydrosart膜型及びセルロース膜型の３種類を用いた全血中自然毒の限外ろ過LC-MS/MS分析について検討した結果、PES膜型、Hydrosart膜型については全血中自然毒302種中100種類程度が吸着等により検出不能であったのに対し、セルロース膜型については302種中290種程度が検出可能であった。実際の中毒時血中濃度を考慮し、自然毒302種中250種を中毒原因スクリーニング分析対象として選定した。

４年度目となる2022年度は、現在保有する毒草、毒キノコ、毒魚等の自然毒成分（塩基性（126種）・中性（119種）・酸性（15種）・１価及び２価カチオン（6種）・両性イオン（36種）系自然毒、計302種）中、前年度までに80点ほどを用いて検討した全血マイクロQuEChERS-LC-MS/MS分析による一斉分析について、最終的に水溶性成分の回収率不良が解決できなかったことから、液－液抽出をベースとするQuEChERS法ではなく、より化合物選択性が低くユニバーサル前処理法に適すると考えられる限外ろ過法を用いた迅速前処理法について、全化合物302種を用いて前処理法の検討を行った。市販限外ろ過カートリッジとしてPES膜型、Hydrosart膜型及びセルロース膜型の３種類を用いた全血中自然毒の限外ろ過LC-MS/MS分析について検討した結果、PES膜型、Hydrosart膜型については全血中自然毒302種中100種類程度が吸着等により検出不能であったのに対し、セルロース膜型については302種中290種程度が検出可能であった。実際の中毒時血中濃度を考慮し、自然毒302種中250種を中毒原因スクリーニング分析対象として選定した。