高齢ドナー由来間葉系幹細胞を用いた骨増生時における細菌由来因子影響の解析研究

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若齢（10週齡）と老齢（78～80週齡）のC57BL/6Jの雄性マウスから、長管骨由来MSCと顎骨MSCを採取した。得られた顎骨 MSCにβ-gal染色を行い、老化細胞の陽性率を検出して比較した。組織分化能は顎骨MSCを分化誘導培地で培養し、アリザリンレッド染色・オイルレッド染色を行った後、骨分化と脂肪分化を評価した。また顎骨MSCの骨分化やSASP、細胞周期に関連する遺伝子発現についてリアルタイムPCRで比較した。顕微鏡下で若齢MSCと老齢MSCの形態を比較すると、老齢MSCは扁平・肥大化している細胞が多く存在し、β-gal染色でも老化細胞陽性率が高い傾向があった。さらに、細胞分化実験では若齢MSC・老齢MSC共に、石灰化や脂肪滴が確認されたが、老齢MSCは若齢MSCと比較して、分化能が低下していることが示された。また、リアルタイムPCR解析により遺伝子発現を比較したところ、一部のSASP関して、老齢MSCでは若齢マウス由来よりも亢進傾向があり、長管骨由来MSCと比較してもその傾向は顕著であった。以上より顎骨MSCにおいては、老齢マウス由来細胞は若齢マウス細胞と比較して老化細胞が多く含まれ、SASPが亢進し、組織分化能が低下している可能性が示された。老齢マウスからの顎骨MSCの採取法確立や、老齢マウス入手に時間がかかっているものの、実験は確実に進行し、結果は得られてきている。今後も計画どおり遂行していく予定である。