A study on DNA damages in germ cells of male mice and germline mutations induced in the offspring

本研究は、遺伝毒性物質が生殖細胞にDNA損傷および突然変異を誘発し、次世代個体のゲノムに突然変異(de novo mutation)をもたらすリスクについて検討する。雄性生殖細胞のDNA損傷（DNA付加体形成）が次世代個体ゲノムの突然変異にどのように関与しているかを量的・質的に明らかにすることを目的とする。加熱食品に含まれる変異原物質であるアクリルアミドを8週齢の雄gpt deltaマウスに300, 100, 30 ppmの用量で28日間飲水投与し、最終投与3日後（28+3d）および最終投与100日後（28+100d）に精巣および精巣上体を採取した。精巣からDNAを抽出し、DNA付加体（N7-dG-GA）量を測定した結果、28+3d群においてDNA付加体量は用量依存的に増加した。精巣および精子のgpt突然変異体頻度は28+3d群の300 ppm投与群で有意に増加した。次世代個体ゲノムへの影響を調べるため、28日間飲水投与の3日後（28+3d）および49日後（28+49d）に無処理雌個体と交配し、次世代個体を得た。28+49d群の無処理群と300 ppm処理群、28+3d群の100 ppm処理群、陽性対象としてENU投与群について、各1家族（両親＋子4匹）計24匹の全ゲノム解析を実施した。全ゲノム解析によりSNVの親子間比較を行い、次世代個体ゲノムのde novo変異を検出し、次世代突然変異頻度を算出した。28+49d群の300 ppm処理群では無処理群と比較して次世代突然変異頻度が有意に２倍増加した。また、28+3d群の100 ppm処理群では次世代突然変異頻度が有意に２倍増加した。引き続き、処理群で誘発された突然変異の特徴を比較し、曝露時期の影響を分析する。

本研究は、遺伝毒性物質が生殖細胞にDNA損傷および突然変異を誘発し、次世代個体のゲノムに突然変異(de novo mutation)をもたらすリスクについて検討する。雄性生殖細胞のDNA損傷（DNA付加体形成）が次世代個体ゲノムの突然変異にどのように関与しているかを量的・質的に明らかにすることを目的とする。加熱食品に含まれる変異原物質であるアクリルアミドを8週齢の雄gpt deltaマウスに300, 100, 30 ppmの用量で28日間飲水投与し、最終投与3日後（28+3d）および最終投与100日後（28+100d）に精巣および精巣上体を採取した。精巣からDNAを抽出し、DNA付加体（N7-dG-GA）量を測定した結果、28+3d群においてDNA付加体量は用量依存的に増加した。精巣および精子のgpt突然変異体頻度は28+3d群の300 ppm投与群で有意に増加した。次世代個体ゲノムへの影響を調べるため、28日間飲水投与の3日後（28+3d）および49日後（28+49d）に無処理雌個体と交配し、次世代個体を得た。28+49d群の無処理群と300 ppm処理群、28+3d群の100 ppm処理群、陽性対象としてENU投与群について、各1家族（両親＋子4匹）計24匹の全ゲノム解析を実施した。全ゲノム解析によりSNVの親子間比較を行い、次世代個体ゲノムのde novo変異を検出し、次世代突然変異頻度を算出した。28+49d群の300 ppm処理群では無処理群と比較して次世代突然変異頻度が有意に２倍増加した。また、28+3d群の100 ppm処理群では次世代突然変異頻度が有意に２倍増加した。引き続き、処理群で誘発された突然変異の特徴を比較し、曝露時期の影響を分析する。