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Revalidation of zoonotic potential of Blastocystis based on the DNA samples obtained from endemic area of fecal-oral infection.

根据粪口感染流行区获得的 DNA 样本重新验证芽囊原虫的人畜共患潜力。

基本信息

批准号：
18K07085
负责人：
吉川尚男
金额：
$ 2.33万
依托单位：
Nara Women's University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は水道や電気、トイレなどがない弥生時代と同等な生活様式で暮らしているインドネシアのスンバ島のワインヤップ地域の住民と家畜動物から得られた糞便材料から直接抽出したDNA材料を用いて、腸管寄生性原虫ブラストシスチスの人獣共通感染性について調べることが目的である。ブラストシスチスは遺伝的に多様な生物集団であるため、簡単に比較することはできず、さまざまな動物由来の異なった集団が混ざっているDNA材料では、その中から個別の集団を個々に取り出し、比較することは非常に困難である。しかし、我々が開発したサブタイプ特異的プライマーを用いたPCR法を応用すると、多様なサブタイプ集団のDNA材料から特定のSTの遺伝子情報のみを増幅することが可能となった。この増幅産物を、さらにサブクローニングすることで同一サブタイプ内の異なる遺伝子集団の存在の有無も把握できることが、昨年度までの研究成果で明らかとなった。今年度の成果は、住民と動物から得られたDNA材料からPCR増幅した試料を、さらにサブクローニング法により、少なくとも5個以上の多クローンを採取し、それらの遺伝子情報を解析し、同一サブタイプ内の異なる遺伝子集団の有無を把握した。この結果と、糞便材料中のブラストシスチスのDNA量とPCR増幅強度の結果と照合し、住民と動物の体内で増殖しているブラストシスチスについて詳細に解析を行なった。その結果、ブタとヤギの体内で増殖しているサブタイプ5のブラストシスチスは全く別物であることが判明した。すなわち、現地のブタとヤギにはサブタイプ5のブラストシスチスが腸管内に定着し増殖していたが、それぞれ遺伝的に異なった集団であることが示された。今後は、このような詳細な比較をヒトとヤギの両方から検出されたST1について実施し、ST1の特定の集団が人獣共通感染性であることを裏付ける根拠を強固に示したいと考えている。

This study aims to investigate the effects of water and electricity on the development of intestinal parasites and human infection. The DNA material of the animal origin is very difficult to extract and compare. The DNA material of the multi-media group was amplified by PCR, and the DNA information of the specific ST was amplified. The results of this research show that there is no certainty about the existence of different genetic subsets in the same site. This year's results include the analysis of DNA information from more than 5 samples obtained from different DNA samples from different animals and inhabitants, the determination of the presence or absence of different DNA subsets within the same sample, and the analysis of DNA samples from different DNA samples obtained from different animals and inhabitants. The results showed that the DNA content of faeces and PCR amplification intensity in faeces were analyzed in detail. The result is that the growth rate of the body is higher than that of the body. All right, well, let's get this over with. In the future, we will make a detailed comparison between ST1 and ST1. We will make a detailed comparison between ST1 and ST1. We will make a strong comparison between ST1 and ST1.