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内在性酸化ストレス制御による発がん初期シグナル分子の同定

内源性氧化应激控制的早期致癌信号分子的鉴定

基本信息

批准号：
18K07250
负责人：
岡素雅子
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Fukuoka Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-01 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K07250/
关键词：
Carcinogenesis ROS human iPS cell Mitochondria human iPS cell 酸化ストレス発がんヒトiPS細胞

项目摘要

１］　分化初期段階のヒトiPS細胞における内在性酸化ストレスによる発がん解析内在性ROS生成を制御可能なヒトiPS細胞株、ChiPSC12-M細胞樹立を確認した。分化初期にROSを生成するChiPSC12-M細胞株を用いてマウスにおける腫瘍形成能を解析した。分化初期のDay1においてTet-Expressを投与したChiPSC12-M細胞株を、4週齢のBALB/cAJcl-nu/nu マウスの背部に皮下接種した（1 x 106-7cells/0.2 ml マトリジェル希釈）。結果、8週間後に非処理群では腫瘍形成を認めなかったが、ROS生成群において6匹中４匹で有意な腫瘍形成を認めた。さらに移植部分の免疫組織化学解析により、細胞増殖のマーカー、Ki-67陽性細胞の比率が非処理群と比較し、腫瘍部分では4.7倍の有意な増加を示していた。酸化ストレスにより発がん初期に変動するシグナル分子を探索するため、これらの腫瘍形成能をもつChiPSC12-M細胞株において、RNA-seqによる遺伝子発現解析を行った。非処理群と比較しTet-Express処理群において、有意な発現増加を示す27の転写産物と発現低下を示す46の転写産物を同定した。増加を示した転写産物には発生の初期段階で発現が増加し、発がん促進の関与が示唆される転写因子が含まれていた。同定した発がん初期シグナルの候補遺伝子のいずれも、報告されたcancer driver genesと重ならなかった。さらにパスウェイ解析IPAにより、候補遺伝子群の一部がネットワークを構成し、直接あるいは間接的にcancer driver genes の発現制御に関与することが示唆された。本研究の成果は2019年4月末に OXFORDUNIVERSITY PRESS のジャーナル、Carcinogenesisに受理された。

1]iPS cell line and ChiPSC12-M cell line were established in the early stage of differentiation. The ChiPSC12-M cell line, which produces ROS during the early stages of differentiation, was used to analyze tumor formation. ChiPSC12-M cell line was inoculated subcutaneously (1 x 106-7cells/0.2 ml) at the beginning of differentiation on Day1 and at 4 weeks. Results: After 8 weeks, 4 out of 6 mice in the untreated group and 4 out of 6 mice in the ROS producing group were found to have tumor formation. Immunohistochemical analysis of the transplanted part showed a 4.7-fold increase in the ratio of Ki-67 positive cells compared with untreated groups and tumor parts. ChiPSC12-M cell line was used to analyze the expression of genes in the early stages of acidification and tumor formation. Compared to Tet-Express processing, intentional increase in write product and decrease in write product are consistent. The increase in the number of products in the early stages of development, the increase in the number of products in the early stages of development, and the increase in the number of products in the early stages of development include: In the same way, the candidate genes of the early stage of the disease are reported. Part of the candidate gene group is composed of direct and indirect cancer driver genes. The results of this study were accepted by OXFORDUNIVERSITY PRESS at the end of April 2019.