多発性骨髄腫が分泌するエクソソームによる骨分化抑制機構の解明

阐明多发性骨髓瘤分泌的外泌体抑制骨分化的机制

• 批准号: 18K15213
• 负责人: 幾尾 真理子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K15213/
• 关键词: Extracellular vesicles; 多発性骨髄腫; 骨分化; 骨芽前駆細胞; 細胞外小胞; Extracellualr vesicle; エクソソーム; Smad; BMP

本研究の目的は、多発性骨髄腫（Multiple myeloma, MM）が骨芽前駆細胞の骨分化を細胞外小胞（エクソソーム、Extracellualr vesicle、EV）を介して阻害するか、またその分子機構を明らかにすることである。EVはエンドソームに由来する100 nm程度の細胞外小胞であり、細胞間情報伝達に寄与する。骨芽前駆細胞を骨分化因子BMP2で刺激すると、BMP/Smad経路の転写因子Smadが細胞質から核内に移行して骨分化因子の転写を促進する。マウス骨芽前駆細胞またはヒト骨肉腫細胞株にMMが分泌したEV（MM-EV）を添加すると、核内に移行したSmadによる骨分化因子転写促進活性が抑制された。Smad及びEVに応答するプロモーター領域を同定し、同プロモーター領域に作用してSmadの転写促進活性を阻害する転写因子Aに着目した。マウス骨芽前駆細胞における転写因子A標的遺伝子の発現はMM-EVの添加により上昇した（マイクロアレイ法）。MM-EV中に転写因子Aタンパク質が存在した（ウェスタンブロット法）。マウス骨芽前駆細胞またはヒト骨肉腫細胞株を使って検討したところ、MM-EVを添加するとA標的遺伝子の発現が誘導された（定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応）。転写因子Aを活性化するサイトカインはBMP2作用時の骨分化因子発現誘導を抑制した。MM-EV添加によって核内の転写因子Aが増加した（細胞免疫染色法）。転写因子A不可逆的阻害剤をMM-EVに作用させるとMM-EVの骨分化抑制活性が失われた。これらの結果は、多発性骨髄腫がEVを介して骨芽前駆細胞に転写因子Aを輸送し、骨芽前駆細胞の骨分化を抑制することを示唆する（Journal of Extracellular Vesicles, in revise）。

The purpose of this study is to determine the bone differentiation of multiple myeloma (MM) pre-surgical cells and the extracellular cells (Extracellualr vesicle, EV) するか, またそのmolecule mechanism を明らかにすることである. The origin of EV technology is the 100 nm level of extracellular cells and intercellular information. The pre-bone bud cells are stimulated by the bone differentiation factor BMP2, and the BMP/Smad road is written by the factor Smad, which is cytoplasmic and intranuclear and migrates by the bone differentiation factor and is promoted by the bone differentiation factor. The pre-surgical bone cell line, the osteosarcoma cell line, the MM secretion of EV (MM-EV), the addition of intranuclear Smad, the osteodifferentiation factor, the promotion activity, and the suppression of the activity. Smad and びEV に応respond するプロモーターfield を Same setting し, プロモーター にeffect してSmad の転write promotion activity をHinder する転WRITE factor A に目した. The MM-EV method is used to write factor A in pre-budding cells and to write factor A. In MM-EV, the factor Aタンパク性がexistentした (ウェスタンブロット method) is used. Masato pre-budding cell line, Osteosarcoma cell line, MM-EV Add the するとA standard legacy の発 appear が induced された (quantitative reverse writing ポリメラーゼ chain reaction). It activates and inhibits the induction of bone differentiation factor A when BMP2 acts on it. MM-EV is added with nuclear factor A and is added (cell immunostaining method). The irreversible blocking effect of factor A on the bone differentiation-inhibiting activity of MM-EV is also lost.これらのRESULTSは、Polychondrosis がEVをmediated してPre-bone budding cells 転Written factor A をtransport し、Bone differentiation のinhibition of budding pre-budding cells することを Showing する (Journal of Extracellular Vesicles, in revise).

项目成果

The relationship between human aging and advanced glycation end products of extracellular vesicles in serum.

人体衰老与血清细胞外囊泡晚期糖基化终末产物的关系。

• 发表时间: 2018
• 作者: Mariko Ikuo;Megumi Okada;Shigeyuki Teranishi;Masaki Kinehara;Akira Shimamoto;and Hidetoshi Tahara;韓 佳延,西山 有希,矢野 公義,幾尾 真理子,田原 栄俊
• 通讯作者: 韓 佳延,西山 有希,矢野 公義,幾尾 真理子,田原 栄俊

骨芽前駆細胞の骨分化経路BMP/Smadは、核内DNA結合Smadを標的とする多発性骨髄腫由来分泌小胞exosomeによって抑制される

骨祖细胞的成骨分化途径 BMP/Smad 受到多发性骨髓瘤来源的分泌囊泡外泌体的抑制，该外泌体靶向核 DNA 结合的 Smad。

• 发表时间: 2018
• 作者: 幾尾 真理子;杉崎 圭;寺町 順平;田原 栄俊;安倍 正博;伊藤 孝司
• 通讯作者: 伊藤 孝司

臨床免疫・アレルギー科 Vol.72, No.1 特集II エクソソーム 細胞外小胞（エクソソーム）と細胞老化

临床免疫学和过敏第 72 卷第 1 期专题 II 外泌体 细胞外囊泡（外泌体）与细胞衰老

• 发表时间: 2019
• 作者: 幾尾真理子;田原栄俊
• 通讯作者: 田原栄俊

Extracellular vesicles derived from senescent cells repress tumor growth via miRNAs

来自衰老细胞的细胞外囊泡通过 miRNA 抑制肿瘤生长

• 发表时间: 2018
• 作者: Mariko Ikuo;Megumi Okada;Shigeyuki Teranishi;Masaki Kinehara;Akira Shimamoto;and Hidetoshi Tahara
• 通讯作者: and Hidetoshi Tahara